INVESTIGADORES
GERMAN Olga Lorena
congresos y reuniones científicas
Título:
La melatonina activa mecanismos de señalizacion intracelulares en los fotorreceptores in vitro como protección frente al daño oxidativo
Autor/es:
MONACO, S.; GERMAN, O.L.; ROSESTEIN, R.; ROTSTEIN, N.; POLITI, L.E.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; VIII Congreso Anual de la Asociación de Visión y Oftalmología (AIVO); 2011
Resumen:
Objetivos: En muchas enfermedades neurodegenerativas de la retina, los
fotorreceptores (FR) degeneran por apoptosis. El daño oxidativo participaría en
la activación de la apoptosis; es importante entonces identificar moléculas y
mecanismos que protejan a los FR de dicho daño. Por su potente acción
antioxidante la melatonina (Mel) ha sido propuesta como factor de protección ante
el daño oxidativo. Previamente demostramos que en ausencia de factores de
protección, los FRs desarrollan apoptosis durante el desarrollo in vitro, o
ante el daño oxidativo inducido con H2O2., y que la Mel protege
a los FR de la apoptosis y promueve su
diferenciación. Investigamos ahora qué vías activaría para ejercer estos
efectos.
Materiales y Métodos: cultivos neuronales de retina de rata se suplementaron al
día 0 con o sin 40nM Mel, y se trataron a día 3 con
10mM H2O2, o se mantuvieron por 6 días in vitro. Para analizar si la Mel
activaba la vía de las ERK/MAPK o la de PI3K/Akt se agregaron los inhibidores específicos U0126 o LY294002,
respectivamente, previo al agregado de Mel. La apoptosis se determinó por
ensayo de TUNEL; la formación de ROS con la sonda DFCA y la actividad de la
enzima glutatión peroxidasa (GPx) con un kit específico.
Resultados: La Mel disminuyó el porcentaje de FR apoptóticos y la formación de ROS en 15% y 40%,
respectivamente, respecto a los controles. El tratamiento con H2O2
aumentó la apoptosis y la formación de ROS en los cultivos, mientras que
el agregado de Mel preservó estos
parámetros en valores cercanos a los de los controles. Además, la Mel produjo
un aumento significativo en la actividad de GPx frente al tratamiento con H2O2.
El agregado de U0126, pero no de LY294002, inhibió el efecto antiapoptótico de
Mel.
Conclusiones: estos resultados sugieren que la Mel ejercería
un efecto de protección dual, actuando como antioxidante y activando la vía de
señalización de la ERK/MAPK para promover la supervivencia de los FR.