Los anticuerpos de pacientes con echinococcosis quística reconocen tres histonas H2A.

MAGLIOCO A; AGUERO F; VALACCO P; JUAREZ VALDEZ A; PAULINO M; FUCHS A

Jornada; XXXV JORNADAS NACIONALES DE HIDATIDOSIS LVII JORNADAS INTERNACIONALES HIDATIDOSIS; 2021

Introducción: la equinococcosis quística (EQ) es una enfermedad zoonótica global producida por el Echinococcus granulosus s.l. El descubrimiento de nuevos antígenos podría mejorar el diagnóstico serológico de la enfermedad en humanos. Las proteínas de la línea celular EGPE, obtenida en nuestro laboratorio desde protoescólices de Echinococcus granulosus G1 (Echeverria et al, 2010), fueron reconocidas por sueros de pacientes con EQ (Maglioco et al, 2019). Objetivos: el objetivo del proyecto es identificar las proteínas reconocidas por los sueros de los pacientes con EQ. El objetivo de este trabajo fue estudiar las histonas parasitarias H2A identificadas como antigénicas. Metodología: se utilizaron dos fuentes de antígenos: extracto celular de 20 días y sobrenadante de colonias de EGPE. Las proteínas se colocaron en columnas de afinidad de proteínas-G construidas con sueros de pacientes con 1) EQ de localización hepática o 2) otras parasitosis. Las proteínas eluídas concentradas, se corrieron en SDS-PAGE 15%, se tiñeron y enviaron para su identificación por proteómica (CEQUIBIEM, FCEyN, UBA). Se realizó el modelado de las proteínas y su validación por dinámica molecular (NAMD 2.14). Se realizó la predicción de epítopes mediante IEDB (epítopes lineales y Discotope 2.0) y ABCpred. Los protocolos fueron aprobados por el Comité de Ética de la "UAI". Resultados: entre las distintas proteínas se identificaron 3 histonas H2A con distinta cantidad de aminoácidos (aa) y diferente estructura terciaria: W6UJM4 (189 aa) y W6U132 (518 aa) en sobrenadante y W6U0N3 (195 aa) en extracto celular. Las tres histonas poseen un alto contenido de aa no polares en las zonas de mayor movilidad, en particular se encuentra prolina en W6UJM4 y W6U132. Se identificaron epítopes lineales y conformacionales en las tres histonas. Conclusiones: las tres histonas identificadas pueden ser candidatos antigénicos, pero es necesaria mayor investigación para determinar su utilidad diagnóstica.