Caso Clínico: Hidatidosis Quística. Gato doméstico como hospedero intermediario.

MELISA S BARBERY VENTURI; ANDREA MAGLIOCO; MIANA V; PRIETO-GONZÁLEZ E; FUCHS A; AVILA G; MARÍA LAURA GERTISER; FERRARI F; CORREA A; FERREYRA M; PÉREZ M; ROSENZVIT M; JENSEN O

Congreso; XVI Congreso Nacional AVEACA; 2016

La hidatidosis es una enfermedad producida por el Echinococcus granulosusus (E.g), constituye un serio problema socioeconómico, es la zoonosis parasitaria más importante en la Patagonia, siendo el E.g sensu lato la única especie detectada en la región y la cepa G1 encontrada en ovinos, perros y humanos. El gato doméstico no juega ningún papel como hospedero definitivo y se han descrito casos aislados como intermediario, presentando todos quistes parasitarios hepáticos y/o poliquísticos abdominales; uno de los casos fue diagnosticado como G1.En Uruguay se describió un caso de hidatidosis en gato doméstico asociado a FIV (Armua - Fernandez. et al; 2013). Este caso clínico se trata de una hembra mestiza castrada que consulta por distensión abdominal y dolor punzante que convive en un patio con perros y gatos. La ecografía, evidencia vesículas abdominales por lo cual se le realiza una laparotomía exploradora; a la necropsia se extrajo el material parasitario que confirmará el diagnostico. Objetivos. En este trabajo se presentarán estudios moleculares realizados en el material parasitario y de diagnóstico en el entorno humano, sobre el caso aislado de hidatidosis de un gato doméstico como hospedero intermediario, detectado en la provincia de Chubut ? Argentina, caracterizado sensu stricto G.Materiales y Métodos. A) Caracterización molecular del material parasitario. La caracterización genotípica se realizó mediante PCR del gen mitocondrial CO1 de la citocromo c oxidasa y del Ag B de E.g con posterior secuenciación de los fragmentos y análisis bioinformático. El material parasitario fue fijado en formol neutro y puesto a cultivar. Se realizó una Inmunohistoquímica (IHQ) utilizando el ABCAM 38736(Anti AgB/5).Número modal de cromosomas de las células provenientes del metacestode, cultivados luego de la incubación con Colcemid. B) Diagnóstico de hidatidosis en el entorno - 1) Recolección de diez muestras séricas de los humanos convivientes del gato para el diagnóstico serológico con el Kit de Polychaco. 2) Realización del extracto proteico de las vesículas parasitarias (buffer con CHAPS 0.5% y cuatro ciclos de congelación/descongelación) para la realización de un Western Blot en condiciones desnaturalizantes en gel de poliacrilamida (15%):10µg proteína/calle; luego de la transferencia se estudió la reactividad de las muestras séricas humanas con el material parasitario, usando como segundo anticuerpo α-IgG humana- fosfatasa alcalina. El control positivo lo constituyó la incubación de la transferencia proteica con el preparado comercial ABCAM 38736.3) Estudio de la localización de los antígenos reconocidos por los sueros humanos por IHQ, se procedió a incubar el material parasitario con el suero humano que reconoció el lisado de proteínas parasitarias, utilizando como segundo anticuerpo una α-IgG humana ?HRP.Resultados.A) Caracterización Molecular del gen mitocondrial CO1 y Ag B, reconfirmó que el material parasitario provenía de E.g. La presencia y localización en el metacestode del AgB/5, se observó mediante IHQ. El número modal presento dos poblaciones 28 y 40. B) El entorno: El test Polychaco para hidatidosis fue negativo en todos los sueros humanos analizados. El WB mostró que uno de los 10 sueros humanos analizados reconoció el lisado parasitario (39 kDa), no coincidiendo la banda proteica con las bandas proteicas reconocidas por el ABCAM (55-24-15-12-6 kDa). Por IHQ, el suero positivo no reconoció las mismas estructuras parasitarias que el ABCAM.Discusión. El gato doméstico puede constituir un hospedador intermediario a tener en cuenta en futuros estudios epidemiológicos. El ensayo de WB y la IHQ realizada con los sueros humanos en contacto con el gato infectado y su no coincidencia, con las bandas proteicas y localización reveladas por el ABCAM, sugiere que otras proteínas a las estandarizadas para el diagnóstico de hidatidosis, tendrían que ser evaluadas para estos fines. Las dos poblaciones del número modal de cromosomas sugiere la presencia de fusión celular en el metacestode.