Las células estromales de los ganglios linfáticos incrementan la sobrevida in vitro de células T regulatorias CD4+?.

CAMICIA G; BADANO N; LORENZO D; MAGLIOCO A; PIAZZON I; NEPOMNASCHY I

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

El estroma de los ganglios linfáticos (GL) provee el microambiente apropiado para el funcionamiento y la regulación de las células del sistema inmune. Las células estromales (CE) de los GL sintetizan la matriz extracelular (ECM) y secretan diversas citoquinas y quemoquinas. Con el objeto de investigar el efecto de las CE sobre la apoptosis y proliferación de células T regulatorias CD4+, desarrollamos cultivos de CE de GL. Incluimos CE de ratones wild tpye (wt) y CTSLnkt/nkt (nkt), ya que los GL de éstos últimos muestran un aumento en las proteínas de la ECM que correlaciona con un incremento en el número absoluto de células CD4+CD25+Foxp3+. Dado que en los GL el 90% de las células CD4+CD25+ expresan Foxp3, incubamos por 48 hs células naive de GL en presencia o ausencia de CE y, luego de confirmar la expresión de Foxp3, evaluamos el porcentaje (%) de apoptosis en la población CD4+CD25+ (Treg). La presencia de CE disminuyó significativamente el % de apoptosis in vitro de células Treg, en forma dependiente de la concentración de CE y sin observarse diferencias entre CE nkt y wt: media % anexina V+ en Treg±DS, n=3: CEnkt: 23±8; CEwt: 29±6; sinCE: 59±3; CE vs sinCE p menor 0,001. Ensayos con células CD4+CD25+ purificadas arrojaron resultados similares. En presencia de transwells sólo se observó una leve disminución en el % de apoptosis. El aumento en la sobrevida de las células Treg cocultivadas con CE correlacionó con un aumento en la expresión de Bcl-2: media IFM Bcl-2 en Treg±DS, n=3: CEnkt: 97±17; CEwt: 99±6; sinCE: 65±3; CE vs sinCE p menor 0,001. No detectamos proliferación basal de células Treg cultivadas con o sin CE. Estos resultados indican que el cocultivo con CE aumenta la viabilidad de las células Treg in vitro. Este efecto involucra a la molécula antiapoptótica Bcl-2 y es dependiente del contacto con el estroma. Estos resultados podrían constituir un valioso aporte para el cultivo de células Treg, herramienta de importancia en el desarrollo de terapias inmunológicas.