INVESTIGADORES
MAGLIOCO Andrea Florencia
congresos y reuniones científicas
Título:
Las células estromales de ganglios linfoides aumentan la sobrevida in vitro de linfocitos T y B
Autor/es:
CAMICIA G; LORENZO D; BADANO N; MAGLIOCO A; SIACHOQUE N; CABRERA G; PIAZZON I; NEPOMNASCHY I
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; 53° Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica-Sociedad Argentina de Fisiologia; 2008
Institución organizadora:
SAIC-SAFI
Resumen:
0229 (447) LAS CÉLULAS ESTROMALES DE GANGLIOS
LINFOIDES AUMENTAN LA SOBREVIDA IN VITRO DE
LINFOCITOS T Y B. G L Camicia 1, D Lorenzo 1, N Badano 1,
A Maglioco 1, N Siachoque 1, G Cabrera 1, I Piazzon 1, I
Nepomnaschy 1
1ILEX/CONICET, Academia Nacional de Medicina
<gabrielacamicia@yahoo.com.ar>
Los ratones mutantes para catepsina L (nkt) presentan altos
números de linfocitos en los ganglios linfoides (GL) que
correlacionan con aumentos en los niveles de glicoproteínas de
la matriz extracelular (ECM) (Lombardi y col, JImmunol. 174:7022,
2005). Con el objeto de investigar la influencia del estroma de los
GL en las poblaciones linfocitarias, seleccionamos células
estromales (CE) -principales productoras de ECM- por cultivo a
largo plazo de células adherentes de GL de ratones nkt (CEnkt)
y wt (CEwt) (pasaje 11). La ausencia de marcadores de linaje
endotelial, macrofágico y dendrítico (FACS), la morfología
fibroblástica y la expresión de mRNA para gp38 (RT-PCR) sugieren
la obtención de fibroblastos reticulares. Evaluamos la influencia
de las CE en la sobrevida y proliferación linfocitaria in vitro
cocultivando linfocitos de GL de ratones wt en presencia o ausencia
de CE wt y nkt. Determinamos los porcentajes de apoptosis y
proliferación por marcación con ioduro de propidio y análisis por
FACS a 1, 2, 3 y 7 días de cocultivo. Aunque no se observaron
diferencias en los porcentajes de proliferación, la presencia de CE
disminuyó el porcentaje de apoptosis de células CD4+ y B220+,
siendo mayor el efecto de las CEnkt. Ej. día 2 (media %
hipodiploidía ±DS; n=3) células CD4+: CEnkt: 0,19±0,02; CEwt:
2,42±0,7; sinCE: 13,3±1,5; CEnkt vs sinCE y CEwt vs sinCE
p<0,005; CEnkt vs CEwt p<0,05. En células B220+: CEnkt:
2,08±0,03; CEwt: 19,9±6,1; sin CE: 73,5±4,7; CEnkt vs sinCE
p<0,005; CEwt vs sinCE y CEwt vs CEnkt p<0,05. Ensayos de RTPCR
mostraron expresión de mRNA para IL-7 en las CE. El medio
condicionado de CE disminuyó el porcentaje de apoptosis,
aunque en menor proporción que las CE, siendo el efecto del
medio condicionado de CEnkt mayor que el del CEwt. Conclusión:
las CE de GL incrementan la viabilidad de linfocitos TCD4+ y
B220+ in vitro, efecto que estaría mediado en parte por factores
solubles cuya síntesis y/o concentración estaría incrementada en
las CEnkt.