Cambios en la expresi¨®n de aromatasa por exposici¨®n cr¨®nica a 17¦Â-estradiol a concentraciones ambientalmente relevantes.

GUYÓN, N.F.; AMÉ, M. V.; ROGGIO, A.; WUNDERLIN D.A.; ÁNGELES BISTONI, M.A.

San Juan

Congreso; 2da. Reuni¨®n Conjunta de las Sociedades de Biolog¨ªa de la Rep¨²blica Argentina.; 2011

SAIB

Existe evidencia de que los niveles de compuestos estrog¨¦nicos detectados en muchos ambientes acu¨¢ticos pueden ser lo suficientemente altos para causar efectos adversos en la reproducci¨®n de poblaciones de peces silvestres. Determinados t¨®xicos afectan la enzima aromatasa P450 que cataliza la conversi¨®n de andr¨®genos en estr¨®genos. El objetivo del presente trabajo fue investigar el efecto de la exposici¨®n cr¨®nica a 17¦Â-estradiol (E2) sobre la expresi¨®n de los genes cyp19a1a (aromatasa gonadal) y cyp19a1b (aromatasa cerebral) como un biomarcador de efecto. Se realizaron ensayos est¨¢ticos durante 28 d¨ªas exponiendo 80 machos adultos de Jenynsia multidentata (Anablepidae, Cyprinodontiforme) a concentraciones subletales y ambientalmente relevantes de E2: 0 (control), 50, 100 y 250 ng.L-1. Se extrajeron cerebros y g¨®nadas, se realiz¨® una transcripci¨®n reversa y se evaluaron los cambios en la expresi¨®n de ambos genes mediante PCR en Tiempo Real. Conjuntamente se tomaron muestras de agua de las peceras para determinar el contenido de E2 en las mismas. Los resultados indicaron que la estabilidad del E2 en soluci¨®n fue independiente de la concentraci¨®n testeada, mostrando niveles residuales del 44.7 ¡À 6.2% despu¨¦s de las 48 horas, momento en el cual se realizaba el recambio de agua de las peceras. La expresi¨®n de cyp19a1b se vio significativamente aumentada luego de la exposici¨®n a E2, incluso a la concentraci¨®n m¨¢s baja ensayada (50 ng.L-1). Si bien no hubo diferencias significativas en la abundancia de transcripto de cyp19a1b entre las distintas concentraciones, se observ¨® una tendencia al aumento concentraci¨®n-dependiente. La expresi¨®n de cyp19a1b evidenci¨® una inducci¨®n de 3; 3.8 y 5 veces con respecto al grupo control en los individuos expuestos a 50, 100 y 250 ng.L-1 E2, respectivamente. Por el contrario, no se observaron efectos significativos en la expresi¨®n de cyp19a1a. Esta respuesta diferencial de los genes cyp19a1 es¦Â-estradiol (E2) sobre la expresi¨®n de los genes cyp19a1a (aromatasa gonadal) y cyp19a1b (aromatasa cerebral) como un biomarcador de efecto. Se realizaron ensayos est¨¢ticos durante 28 d¨ªas exponiendo 80 machos adultos de Jenynsia multidentata (Anablepidae, Cyprinodontiforme) a concentraciones subletales y ambientalmente relevantes de E2: 0 (control), 50, 100 y 250 ng.L-1. Se extrajeron cerebros y g¨®nadas, se realiz¨® una transcripci¨®n reversa y se evaluaron los cambios en la expresi¨®n de ambos genes mediante PCR en Tiempo Real. Conjuntamente se tomaron muestras de agua de las peceras para determinar el contenido de E2 en las mismas. Los resultados indicaron que la estabilidad del E2 en soluci¨®n fue independiente de la concentraci¨®n testeada, mostrando niveles residuales del 44.7 ¡À 6.2% despu¨¦s de las 48 horas, momento en el cual se realizaba el recambio de agua de las peceras. La expresi¨®n de cyp19a1b se vio significativamente aumentada luego de la exposici¨®n a E2, incluso a la concentraci¨®n m¨¢s baja ensayada (50 ng.L-1). Si bien no hubo diferencias significativas en la abundancia de transcripto de cyp19a1b entre las distintas concentraciones, se observ¨® una tendencia al aumento concentraci¨®n-dependiente. La expresi¨®n de cyp19a1b evidenci¨® una inducci¨®n de 3; 3.8 y 5 veces con respecto al grupo control en los individuos expuestos a 50, 100 y 250 ng.L-1 E2, respectivamente. Por el contrario, no se observaron efectos significativos en la expresi¨®n de cyp19a1a. Esta respuesta diferencial de los genes cyp19a1 esJenynsia multidentata (Anablepidae, Cyprinodontiforme) a concentraciones subletales y ambientalmente relevantes de E2: 0 (control), 50, 100 y 250 ng.L-1. Se extrajeron cerebros y g¨®nadas, se realiz¨® una transcripci¨®n reversa y se evaluaron los cambios en la expresi¨®n de ambos genes mediante PCR en Tiempo Real. Conjuntamente se tomaron muestras de agua de las peceras para determinar el contenido de E2 en las mismas. Los resultados indicaron que la estabilidad del E2 en soluci¨®n fue independiente de la concentraci¨®n testeada, mostrando niveles residuales del 44.7 ¡À 6.2% despu¨¦s de las 48 horas, momento en el cual se realizaba el recambio de agua de las peceras. La expresi¨®n de cyp19a1b se vio significativamente aumentada luego de la exposici¨®n a E2, incluso a la concentraci¨®n m¨¢s baja ensayada (50 ng.L-1). Si bien no hubo diferencias significativas en la abundancia de transcripto de cyp19a1b entre las distintas concentraciones, se observ¨® una tendencia al aumento concentraci¨®n-dependiente. La expresi¨®n de cyp19a1b evidenci¨® una inducci¨®n de 3; 3.8 y 5 veces con respecto al grupo control en los individuos expuestos a 50, 100 y 250 ng.L-1 E2, respectivamente. Por el contrario, no se observaron efectos significativos en la expresi¨®n de cyp19a1a. Esta respuesta diferencial de los genes cyp19a1 es 160 consistente con el hecho de que se han identificado elementos de respuesta a estr¨®genos (ERE) en la regi¨®n promotora de cyp19a1b de varias especies de peces, pero no en la secuencia de cyp19a1a. Los cambios observados en la expresi¨®n de cyp19a1b sugieren su potencial uso como biomarcador sensible de exposici¨®n a compuestos estrog¨¦nicos a concentraciones ambientalmente relevantes.