Transmisión transovárica de Anaplasma marginale en garrapatas Rhipicephalus microplus y evaluación de su capacidad de infección de un bovino susceptible

DE LA FOURNIERE S; GUILLEMI E; JARAMILLO ORTIZ J; SOSA C; SARMIENTO N; WILKOWSKY S. E; FARBER M

Rosario

Congreso; XXII Congreso Latinoamericano de Microbiología. XIV Congreso Argentino de Microbiología; 2016

Asociación Argentina de Microbiologia

Anaplasma marginale es una rickettsia que infecta los glóbulos rojos bovinos ocasionando una enfermedad conocida como anaplasmosis. Es transmitida principalmente por garrapatas, aunque también existe transmisión mecánica por agujas, instrumental de castración, descorne y marcado y por otros insectos hematófagos. La anaplasmosis tiene distribución mundial, aunque ocurre mayormente en zonas tropicales y subtropicales dada su asociación con las garrapatas transmisoras. En Argentina, se encuentra principalmente vinculada a la garrapata del bovino, Rhipicephalus microplus, que a pesar de ser considerada como un factor importante en la propagación de la enfermedad, hasta la fecha no se ha demostrado la existencia de transmisión vertical de A. marginale en este vector. Existe un consenso acerca de la ausencia de trasmisión vertical de la ricketssia en la garrapata, por lo tanto no está demostrado su rol como vector biológico. El objetivo del trabajo fue evaluar la presencia de A. marginale en larvas de R. microplus obtenidas a partir de hembras adultas (teleoginas) colectadas sobre bovinos de zona endémica persistentemente infectados y utilizar estas larvas para reproducir el ciclo de infección en el bovino. Para ello, se colectaron teleoginas de R. microplus de bovinos infectados naturalmente con A. marginale pertenecientes a una zona enzoótica del noreste argentino. Se incubaron en estufa a 28°C para desove y se aisló una fracción de las larvas emergentes para detección molecular de A. marginale mediante PCR haciendo blanco en dos genes diferentes (msp1β y msp5). Se confirmó asimismo la positividad de las teleoginas originarias. Posteriormente, se infestó un bovino previamente esplenectomizado con la fracción restante de larvas provenientes de 4 teleoginas positivas (aproximadamente 320 mg de larvas infectadas). El ternero fue monitoreado (temperatura rectal, hematocrito, positividad de extendido sanguíneo) semanalmente y por un período de 35 días, a fin de determinar la existencia y eventual avance de la infección. Los resultados obtenidos mostraron la positividad, para ambos genes de A. marginale amplificados por PCR, de todas las teleoginas de R. microplus examinadas y también en sus respectivas larvas. Dados estos resultados, se utilizaron nuevas fracciones de estas larvas positivas para infestar experimentalmente al ternero susceptible, en el que al cabo de 22 días post infestación se detectó la presencia de glóbulos rojos infectados con A. marginale en un frotis de sangre extraída de la vena yugular y teñido con Giemsa, un hematocrito de 27% y temperatura rectal de 39°C. En conjunto estos resultados revelan el rol central de R. microplus en la transmisión de A. marginale, a través de la primera demostración experimental del ciclo completo de la bacteria en la garrapata, analizando su presencia en los estadios adulto y larva, y la utilización de éstas para reproducir la infección con A. marginale en los eritrocitos del hospedador mamífero.