Validación de una prueba de ELISA indirecto basado en un multiantígeno recombinante para la detección de anticuerpos contra Babesia bovis

JARAMILLO ORTIZ J; MONTENEGRO, VALERIA NOELY; DE LA FOURNIERE, SOFÍA; FARBER M; WILKOWSKY S. E

Buenos Aires

Congreso; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Sociedad Argentina de Protozoología

Los parásitos protozoarios intraeritrocíticos Babesia bovis y B. bigemina son los agentes etiológicos de la babesiosis bovina, una enfermedad transmitida por garrapatas con gran relevancia económica en el norte argentino. Actualmente, una de las pruebas serológicas de rutina para la detección de esta infección es un ELISA indirecto basado en merozoítos obtenidos en cultivo. La principal desventaja que presenta esta técnica es el elevado costo en la producción del antígeno nativo al tiempo que su obtención resulta laboriosa. Una alternativa sería el desarrollo de antígenos recombinantes que reemplacen el uso de lisados parasitarios. En este trabajo se desarrolló un ELISA indirecto basado en un multiantígeno recombinante de B. bovis (MABbo) formado por la fusión de regiones antigénicas de las proteínas MSA-2c, RAP-1 y HSP20. Para la validación del ELISA se emplearon sueros negativos provenientes de terneros nacidos y criados en una región libre de garrapatas (n=150) y sueros positivos para el ELISA de merozoítos (n=84) provenientes de una región enzoótica. Los resultados se expresaron como porcentajes de positividad respecto de sueros patrón provenientes de animales infectados experimentalmente con B. bovis. Los datos se analizaron por el método estadístico de curvas ROC estableciéndose un punto de corte de 33.4 % con una especificidad y sensibilidad máxima de 86% y 83% respectivamente en un intervalo de confianza del 95%. El test de concordancia entre ambos ELISAs arrojó un valor de índice k de 0,87. Finalmente con el punto de corte establecido, se evaluó lote de 303 sueros provenientes de la Guyana Francesa (cedidos gentilmente por la Dra Nathalie Vachiery (UMR CIRAD-INRA Guadalupe, Francia). De esta muestra, 171 (56.43%) sueros resultaron positivos, mientras que 132 (43.56%) resultaron ser negativos para el ELISA - MABbo. El desarrollo de esta técnica menos costosa podría ser una alternativa comercial en el diagnóstico de la babesiosis bovina en nuestro país.