Predicción integral de epitopes T del parásito intracelular Babesia bovis mediante inmunopeptidómica

VALENZANO MAGALI NICOLE; PARKER R; MONTENEGRO, VALERIA NOELY; PAOLETTA, MARTINA SOLEDAD; NIELSEN M.; TERNETTE N.; WILKOWSKY SILVINA ELIZABETH,

CABA

Congreso; XXXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Sociedad Argentina de Protozoología

La Babesiosis bovina es una infección causada por los parásitos protozoarios Babesia bovis y B. bigemina los cuales desarrollan su ciclo vital en el bovino exclusivamente dentro del eritrocito. Ambas especies son transmitidas por garrapatas que habitan en el NOA y NEA y ocasionan importantes pérdidas económicas al sector ganadero. La infección por Babesia sp. puede controlarse a través de la vacunación con cepas atenuadas pero estas vacunas poseen una serie de desventajas en su producción y uso. Por esto, la identificación racional de epitopes T presentados por las células del hospedador bovino resulta fundamental para su inclusión futura en vacunas de diseño racional como alternativas superadoras a la vacuna viva atenuada. Con este objetivo se identificaron epitopes T presentados naturalmente en el complejo mayor de histocompatibilidad clase II bovino a partir de macrófagos derivados monocitos sanguíneos incubados con eritrocitos infectados con la cepa virulenta de Babesia bovis S2P. Pasadas 24 hs, se realizó la purificación de los complejos MHC II- péptido mediante inmunoprecipitación utilizando un anticuerpo monoclonal específico. Los péptidos T fueron posteriormente eluídos y analizados por espectrometría de masas. Con el set de datos obtenido, se eliminaron aquellos péptidos que se encontraron también el control de macrófagos con eritrocitos normales, los péptidos que presentaron homología con el bovino y aquellos con largo menor a 12 aa. Como resultado, se obtuvieron 48 péptidos específicos presentes en el proteoma predicho de B. bovis. Los mismos corresponden a 20 proteínas, principalmente mitocondriales, ribosomales, de membrana y del apicoplasto. Finalmente, los péptidos encontrados se validarán por citometría de flujo y ELISPOT midiendo la liberación de IFN-g por parte de linfocitos T de bovinos infectados con B. bovis para confirmar su rol funcional en la respuesta tipo Th1 contra este patógeno y su potencial para ser incluídos en vacunas multiepitópicas.