Análisis molecular de dos isoformas de NDPK de Solanum tuberosum.

BACHMANN SANDRA D; ULLOA RITA M

La Plata

Congreso; RAFV 2010; 2010

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

La supervivencia de una planta depende de su capacidad de respuesta a cambios ambientales debiendo integrar para esto las señales externas e internas. Los mecanismos de respuesta a estreses están regulados por vías de transducción de señales que abarca desde la percepción de las señales hasta la expresión de genes permitiendo la adaptación de la planta. Las nucleosido difosfato quinasas (NDPKs) están involucradas en cascadas de señalización en plantas [1] en respuesta a daño mecánico [2], estrés térmico [3], infección por patógenos [4], en la señalización del fitocromo A [5] y en tolerancia a múltiples estreses que involucran acumulación de especies reactivas de oxígeno (ROS)[6]. Son enzimas que catalizan la transferencia del fosfato 4 de NTPs a NDPs por un mecanismo que involucra un intermediario fosforilado y un residuo histidina conservado. En plantas se ha descripto, aparte de la His117 y la Ser119 características del bolsillo catalítico, la Ser69 alejada del dominio quinasa, que es importante para la funcionalidad de la enzima. Se clasifican según su localización: Tipo 1, citosólica; Tipo 2, en el estroma de los cloroplastos y Tipo 3, en el lumen de cloroplasto y en el espacio intermembrana de mitocondria. Se realizó un análisis molecular de las primeras dos isoformas de NDPK aisladas de plantas de papa (S.tuberosum, var. Spunta). StNDPK1 de la cual se amplificó la secuencia codificante completa a partir de ADNc de brotes y la StNDPK2 de la cual se obtuvo un clon parcial a partir de una biblioteca de expresión de estolones. StNDPK1, es una isoforma de tipo 3 que posee un péptido señal a Mitocondria, se detecta expresión en estolones, brotes, yemas y hojas, pero no en tubérculos dormidos. Mientras que StNDPK2 sería una isoforma del tipo I y se detectó expresión solo en estolones. Además se evaluó la expresión de ambas isoformas por RT-PCR en distintos tejidos reproductivos de la planta, estadíos de tuberización.[1] en respuesta a daño mecánico [2], estrés térmico [3], infección por patógenos [4], en la señalización del fitocromo A [5] y en tolerancia a múltiples estreses que involucran acumulación de especies reactivas de oxígeno (ROS)[6]. Son enzimas que catalizan la transferencia del fosfato 4 de NTPs a NDPs por un mecanismo que involucra un intermediario fosforilado y un residuo histidina conservado. En plantas se ha descripto, aparte de la His117 y la Ser119 características del bolsillo catalítico, la Ser69 alejada del dominio quinasa, que es importante para la funcionalidad de la enzima. Se clasifican según su localización: Tipo 1, citosólica; Tipo 2, en el estroma de los cloroplastos y Tipo 3, en el lumen de cloroplasto y en el espacio intermembrana de mitocondria. Se realizó un análisis molecular de las primeras dos isoformas de NDPK aisladas de plantas de papa (S.tuberosum, var. Spunta). StNDPK1 de la cual se amplificó la secuencia codificante completa a partir de ADNc de brotes y la StNDPK2 de la cual se obtuvo un clon parcial a partir de una biblioteca de expresión de estolones. StNDPK1, es una isoforma de tipo 3 que posee un péptido señal a Mitocondria, se detecta expresión en estolones, brotes, yemas y hojas, pero no en tubérculos dormidos. Mientras que StNDPK2 sería una isoforma del tipo I y se detectó expresión solo en estolones. Además se evaluó la expresión de ambas isoformas por RT-PCR en distintos tejidos reproductivos de la planta, estadíos de tuberización.