Modulación de la respuesta de inteferón en células humanas infectadas con virus Junín

CUERVO, EUGENIA; SCOLARO, LUIS

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

Sociedad Argentina de Virología - AAM

El sistema de defensa mediado por interferón (IFN) tipo I es uno de los principales efectores de la respuesta inmunológica innata. Para sobrevivir, la mayoría de los virus contrarrestan este mecanismo de defensa neutralizando la señalización mediada por IFN a diferentes niveles. El virus Junín (JUNV), agente etiológico de la fiebre hemorrágica argentina, es capaz de infectar cultivos celulares produciendo infecciones de tipo agudas, con alta producción de infectividad, síntesis y expresión de todos los antígenos virales y persistentes, con producción baja y aleatoria de partículas infecciosas, ausencia de síntesis de la principal glicoproteína de envoltura (G1) y resistencia a la sobreinfección con virus homólogo. A fin de estudiar la modulación de la respuesta de interferón de infecciones de JUNV in vitro, tanto agudas como persistentes, se empleó el sistema de células de adenocarcinoma de pulmón humano (A549) infectadas con la cepa XJCl3. En primer lugar, se estudió la respuesta de IFN inducida por una infección experimental de las células con JUNV a una moi de 0,001 UFP/cél. La infección se caracterizó por la producción de infectividad, alcanzando un titulo máximo de 8.104 UFP/ml al día 7 p.i. y observándose efecto citopático a partir del día 5 p.i. con un pico de intensidad máxima al día 12 p.i.. A su vez, se cuantificó la producción de IFN por ensayo de actividad biológica a través de su actividad antiviral frente a la infección del virus de la estomatitis vesicular (VSV) en células Vero. Como controles positivos se utilizaron dos muestras comerciales de IFNa  (Avirostat, Gautier Cassara) e IFNb (Betaferon, Schering). Los sobrenadantes de infección de células A549 infectadas con JUNV presentaron un título máximo de 277 ± 29 al día 10 p.i., el cual declina marcadamente durante los días subsiguientes hasta tornarse indetectable al día 50 p.i.. Esta cuantificación se llevó a cabo también en sobrenadantes de células persistentemente infectadas con JUNV, llamadas A3, a los 50 y 498 días p.i. que presentaron títulos de virus infeccioso de 8.104 y 4.102 UFP/ml, respecitvamente, obteniéndose en ambos casos títulos de IFN menores a 10. Las células A3 se caracterizaron por presentar expresión abundante de la nucleoproteína detectada por inmunofluorescencia indirecta y westernblott. Tanto las células sin infectar como las infectadas persistentemente fueron protegidas frente al desafío con VSV por tratamiento con IFN a y b.