La angiotensina (1-7) ejerce un efecto sinérgico con LPS sobre la actividad aloestimulatoria y la producción de MCP-1 (CCL2) en células dendríticas

KA NAHMOD1, G SALAMONE1, M VERMEULEN1, S RAIDEN1, E GAVI1, C ALVAREZ1, T WALTHER2 Y JR GEFFNER1.

La Falda Córdoba

Congreso; LVI Congreso de la SAI. Octubre del 2008.; 2008

SAI

El sistema renina angiotensina (RAS) se vincula a una multiplicidad de procesos biológicos. Durante la última década, ha sido demostrado que otros péptidos del RAS, tales como AIII (A2-8), AIV (A3-8), y A1-7 (Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro), median importantes funciones biológicas Ellos ejercen sus acciones regulatorias en forma endócrina, autócrina o parácrina en funciones tan diversas como la homeostasis del sistema cardiovascular, neurotransmisión, y respuesta inmune. Trabajos previos en nuestro laboratorio demuestran que la AII ejerce un importante rol regulatorio en la fisiología de CD tanto in vivo como in Vitro: la AII es capaz de modular la producción de CD, su fenotipo y funcionalidad.  Nos preguntamos luego si la A1-7, otro peptido del RAS, ejercería algún efecto sobre CD inmaduras obtenidas a partir de monocitos humanos o bien de precursores hemopoyeticos murinos.  Las CD humanas se obtuvieron por cultivo de monocitos en medio suplementado con rhIL-4 + rhGM-CSF durante 6 días. Fueron luego cultivadas durante 24 hs en ausencia o presencia de A1-7 (0,1mM). Observamos mediante citometria de flujo que la A1-7 a) induce un incremento en la expresión de HLA-DR (1275±185  vs 2000±220, Ct-CD vs A1-7-CD, los resultados se expresan como medias de IMF ± ES de 6 experimentos, p<0,5) y b) estimula la actividad aloestimulatoria de las CD humanas (25±9% vs 42±10%, Ct-CD vs A1-7-CD, los resultados se expresan como % de proliferación ± ES de 4 experimentos, p<0,05). A continuación analizamos si la A1-7 era capaz de modular el proceso de maduración de las CD inducido por LPS. CD murinas obtenidas a partir del cultivo de precursores hemopoyeticos en presencia de mGM-CSF durante 8 dias fueron cultivadas durante 24 hs en presencia o ausencia de A1-7 (0,1mM) con o sin LPS (0,1-0,05mg/ml), evaluandose luego su capacidad aloestimulatoria en ensayos de cultivo mixto linfocitario mediante la determinación de la incorporación de timidina tritiada. La A1-7 ejerce un efecto sinergico con el LPS sobre la capacidad aloestimulatoria de CD murinas (12000±1800 vs 13000±2400 vs 22000±1900 vs 35000±3200, para Ct-CD, A1-7-CD, LPS-CD y LPS/A1-7CD, los resultados se expresan como cpm ± ES, n=3, p<0,01).  Por otro lado, CD humanas generadas a partir de monocitos, fueron cultivadas por 24hs en ausencia o presencia de A1-7 (0,1mM) y diferentes concentraciones de LPS (0,1-0,05mg/ml) evaluándose posteriormente la produccion de MCP-1, TNF-alfa e IL-6 en sobrenadante de cultivo mediante ELISA. La A1-7 ejerce un efecto sinergico con el LPS sobre la produccion de MCP-1, un quimioactractante de monocitos, en CD humanas (166±83 vs 97±42 vs 417±73 vs 1175±51, Ct-CD vs A1-7-CD vs LPS-CD vs LPS/A1-7-CD; los resultados se expresan en pg/ml ± ES, n=3, p=0,001). Los resultados presentados demuestran que la A1-7 participa en la respuesta inmune modulando la actividad de CD.