MECANISMOS MOLECULARES INVOLUCRADOS EN LA LIBERACIÓN DE IL-1β POR NEUTRÓFILOS HUMANOS.

GABELLONI M.1; FUXMAN BASS J.2; GEFFNER J.3; SALAMONE G.4; CATALANO M.5; TREVANI A.6

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunol; 2009

La IL-1β es liberada por el procesamiento proteolítico de su precursor, la pro-IL-1β. En distintos tipos celulares, la estimulación de receptores citosólicos de tipo NOD por productos microbianos o señales de daño endógeno conduce a la formación de un inflamasoma, que recluta y activa a la caspasa-1, la enzima responsable del procesamiento de la pro-IL-1β. También, la pro-IL-1β podría ser procesada por mecanismos independientes de caspasa-1, aún no caracterizados. En este trabajo evaluamos la capacidad de los neutrófilos humanos de producir IL-1β y los mecanismos moleculares involucrados. Los neutrófilos pre-tratados con LPS liberaron IL-1β en respuesta a ATP, PMA, sobrenadante de cultivo del patógeno P. aeruginosa (SCPa) y frente al co-cultivo con la bacteria entera (pg/ml IL-1β detectados por ELISA: 15±6; 85±25; 521±85; 361±43; 231±49; 218±55; para medio, LPS -200 ng/ml-, LPS+PMA 20 ng/ml; LPS+ATP 2mM; LPS+5% SCPa o 107 bacterias/ml, respectivamente; n=6, p<0,05). La liberación de IL-1β inducida por todos los agonistas excepto el PMA, fue significativamente reducida por el inhibidor II de caspasa-1 (% inh. 19±4; 59±13; 76±6; para PMA, ATP y SCPa, respectivamente; n= 8, p<0,05). El pre-tratamiento de neutrófilos con DPI (inhibidor de NADPH oxidasa) redujo marcadamente la producción de IL-1β inducida por PMA y SCPa, mientras que el pre-tratamiento con catalasa, que degrada el H2O2 producido por activación de la NADPH oxidasa, incrementó su liberación inducida por ATP, PMA y SCPa. En conjunto, nuestros resultados sugieren que los neutrófilos liberan IL-1β por un mecanismo que involucra la actividad de la caspasa-1, aún cuando no descartan que un mecanismo independiente de caspasa-1 también pueda ser operativo. Al menos en respuesta a PMA y SCPa, la liberación de IL-1β parece requerir la activación de la NADPH oxidasa y, a su vez, los intermediarios reactivos del oxígeno podrían ejercer un mecanismo regulatorio negativo de la liberación de IL-1β.