Vías involucradas en la migración de las células gliales de Muller. Un rol para la ceramida-1-fosfato endógena?

VERA M; PRADO SPALM FH; SIMON M.V.; POLITI L.E.; ROTSTEIN NP.

Buenos Aires

Congreso; XI Reunión Anual AIVO- II Reunión conjunta AIVO-BRAVO; 2016

Asociación Investigación en Visión y Oftalmología

Vías involucradas en la migración de las células gliales de Muller. Un rol para la ceramida-1-fosfato endógena?Vera M., Prado Spalm FH, Simón MV, Politi LE y Rotstein NP.Instituto de Investigaciones Bioquímicas, Depto. Biología, Bioquímica y Farmacia, Universidad Nacional del Sur-CONICET, Bahía Blanca, Argentina. marceverita@gmail.comObjetivos: Múltiples estímulos patogénicos provocan una respuesta reactiva de las células gliales de Muller (CGM), y promueven su capacidad migratoria, contribuyendo así a la etiología de diversas patologías proliferativas de la retina. Los mecanismos y mediadores que participan en esta migración son objeto de intenso estudio. Hemos establecido recientemente que un esfingolípido, la esfingosina-1-fosfato (S1P), estimula la migración de las CGM de retina in vitro. Estudiamos ahora qué vías intracelulares participan en dicha migración y si otro esfingolípido, la ceramida-1-fosfato (C1P) es capaz de estimularla. Métodos: se prepararon cultivos gliales puros de retina de rata de 3 días, que se incubaron en medio con suero, y se repicaron e incubaron hasta ser confluentes. Se analizó la migración glial por la ?técnica de la herida?. Se investigó la participación de las vías de PI3K, ERK/MAPK, p38 MAPK, y Jun quinasa N terminal (JNK), tratando a los cultivos con los inhibidores LY294002, U0126, SB203580 y SP600?, respectivamente, una vez realizada la herida. Se evaluó el efecto del agregado exógeno de C1P y el de inhibir su síntesis endógena con NVP231 sobre la migración. Se determinó por PCR la presencia de la ceramida quinasa (CerK), enzima involucrada en la síntesis de C1P. Resultados: El tratamiento con un inhibidor de la vía de la PI3K inhibió completamente la migración glial, mientras que inhibidores de las vías de Erk/MAPK y p38MAPK no la afectaron. En contraste, la inhibición de la JNK disminuyó marcadamente la migración glial. Las CGM expresan CerK y la inhibición de esta enzima, bloqueando la síntesis endógena de C1P frenó totalmente la migración glial. El agregado exógeno de C1P aumentó esta migración, aunque en forma no significativa. Conclusiones: Estos resultados sugieren que las vías de la PI3K y de la JNK activan la migración de las CGM y que estas células sintetizan C1P que actúa como señal para activar su migración.Financiación: subsidios de SECyT, UNS; CONICET y FONCYT.