Capítulo 67. Tipificación de micobacterias mediante PRA

RITACCO V

Manual de Biología Molecular

Asociación Argentina de Microbiología

Lugar: Buenos Aires; Año: 2011; p. 205 - 206

La patología humana por micobacterias atípicas ha adquirido creciente interés debido a la frecuencia de condiciones sistémicas predisponentes como el SIDA, los tratatamientos inmunosupresores o la edad avanzada. También existen factores de riesgo local como las patologías pulmonares destructivas crónicas (ej. enfermedad fibroquística) y los noveles procedimientos invasivos estéticos y cosméticos. Además, los métodos automatizados de cultivo, de uso cada vez más difundido, alcanzan mayor sensibilidad que los convencionales para el desarrollo tanto de Mycobacterium tuberculosis como de otras micobacterias. La diferenciación entre los distintos miembros del género es determinante para definir el diagnóstico y el manejo médico, en particular, la decisión de aislar al paciente y la instauración del tratamiento antibiótico adecuado.Métodos moleculares de alta precisión dirigidos a las regiones del cromosoma específicas de especie han develado la existencia de más de 100 especies de micobacterias. La secuenciación y la hibridación reversa, esta última en formato de kits comerciales, son sin duda más rápidas y específicas que las pruebas bioquímicas convencionales de identificación. Lamentablemente, esos métodos moleculares son inaccesibles a la mayoría de los laboratorios de diagnóstico de nuestro medio por complejidad y/o costo. Una alternativa eficiente, sencilla y relativamente económica es el presente método molecular ?in house?. Este método permite diferenciar entre miembros del género Mycobacterium a nivel de especie y sub-especie mediante amplificación por PCR seguida de análisis mediante restricción enzimática (PRA, PCR-Restriction Analysis) de un segmento específico de especie del gen que codifica la proteína de shock térmico Hsp 65.