Efecto de Ciprofloxacina en Escherichia coli O157:H7 formadora de biofilm .

2.39 ANGEL VILLEGAS N; PARAJE MG; ALBESA I; BECERRA MC.

Rosario

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología.; 2008

Las bacterias pueden encontrarse como organismos individuales (células planctónicas) o formando parte de un biofilm, constituido por células sésiles unidas irreversiblemente a una superficie. Esta compleja estructura es más resistente a los antibióticos (ATB) que las células planctónicas, aunque el mecanismo preciso de cómo se altera esta sensibilidad no está esclarecido. Se ha descripto la capacidad de Escherichia coli O157:H7 de formar biofilm en diversas superficies. El objetivo fue indagar el efecto de ciprofloxacina (CIP) sobre una cepa de E.coli O157:H7 formadora de biofilm y compararlo con otra no formadora. Se estudiaron dos cepas de E.coli (1 y 2) provistas por un Hospital de la Pcia. de Córdoba. Se determinó la sensibilidad a CIP mediante dilución en caldo de acuerdo a normas del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). A partir de un cultivo overnight se realizó una dilución 1/10 de cada suspensión bacteriana. Se sembró en placas de 96 pocillos y se incubó a 37ºC durante 72 h. Una vez formado el biofilm, se agregó CIP (512-0,06 mg/L). Paralelamente, se realizaron controles sin antibiótico. Luego de 24 h de incubación se retiró el sobrenadante y se coloreó con cristal violeta. La densidad óptica (DO) se determinó a 590 nm. Se estudió la generación de especies reactivas del oxígeno (ERO) en el sobrenadante mediante la reacción de Nitroblue Tetrazolium (NBT). El valor de la concentración inhibitoria mínima (CIM) para la cepa 1 fue de 0,5 mg/L mientras que para la cepa 2 fue de 2 mg/L. Con la coloración con cristal violeta, se apreció que la cepa 2 presentó mayor capacidad de formar biofilm (DO590= 2,326) comparada con la cepa 1 (DO590 = 0,173). En presencia de CIP, la DO de la cepa 1 disminuyó hasta 0,1; mientras que en la cepa 2, la DO disminuyó a valores cercanos a 0,5, lo que indicó que el ATB redujo la formación de biofilm en el tiempo ensayado. En la cepa 2 (formadora de biofilm) se apreció mayor generación de ERO extracelular en condiciones basales (sin ATB) respecto de la cepa 1, por otra parte, hubo inhibición de la generación de ERO en ambas cepas cuando se incubó con CIP. Se describe el efecto inhibitorio de CIP, tanto de la formación de biofilm como de la generación de ERO, aspectos poco investigados en E.coli O157 al presente.