INVESTIGADORES
PARAJE Maria Gabriela
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de la limitación de oxígeno y presencia de agentes reductores en la formación de biofilm de Staphylococcus aureus.
Autor/es:
ARCE MIRANDA, JULIO E.; ÁNGEL VILLEGAS, NATALIA; ALBESA, INÉS; PARAJE, M. GABRIELA.
Lugar:
Asoc Arg de Microb
Reunión:
Congreso; cong arg de microb; 2007
Resumen:
Los biofilm son comunidades de microorganismos unidos a superficies sólidas inmersas en una
matriz extracelular. Ésta, no es sólida y presenta canales que permiten el flujo de agua, nutrientes
y oxígeno incluso hasta las zonas más profundas, sin embargo, dentro del mismo pueden existir
diferentes concentraciones de nutrientes, pH u oxígeno, aumentando la heterogeneidad sobre el
estado fisiológico en el que se encuentra la bacteria dentro del biofilm. Además, cuando el biofilm
crece en volumen, las bacterias del interior tienen menos acceso a los nutrientes, creando
poblaciones bacterianas con diferentes metabolismos. El objetivo de este trabajo es comparar la
capacidad de estimulación de especies reactivas del oxígeno (ROS) y óxido nítrico (ON) que
presentan diferentes cepas de S. aureus formadoras de biofilm en distintas condiciones de cultivo:
medio nutritivo básico como Caldo Tripteína Soya (CTS), medio reductor con Tioglicolato (TIOG),
aerobiosis y microaerofilia, respectivamente. Se trabajó con tres cepas clínicas y una ATCC. La
formación de biofilm se cuantificó por espectrofotometría (O´Tool & Kolter, 1998). Los metabolitos
del oxígeno (ROS intra y extracelular) se determinaron por reducción Azul de Nitro Tetrazolium
(NBT). Se utilizó la técnica de Griess para determinar los niveles de nitrito total producidos en
sobrenadante de cultivo. En aerofilia hubo una mayor producción de biofilm en TIOG que en CTS,
en todas las cepas ensayadas, posiblemente por el menor estrés oxidativo intracelular que
mostraron las células en este medio; sin embargo se observó una mayor producción de ROS y
ON en el sobrenadante de cultivo debido al microambiente reductor. En comparación, en
microaerofilia la producción de biofilm fue menor en ambos medios de cultivo, siendo menor en
CTS, con un importante incremento del estrés intracelular. Las especies extracelulares tanto de
oxígeno como del nitrógeno mostraron un importe incremento en estas condiciones de cultivo en
ambos medios.S. aureus formadoras de biofilm en distintas condiciones de cultivo:
medio nutritivo básico como Caldo Tripteína Soya (CTS), medio reductor con Tioglicolato (TIOG),
aerobiosis y microaerofilia, respectivamente. Se trabajó con tres cepas clínicas y una ATCC. La
formación de biofilm se cuantificó por espectrofotometría (O´Tool & Kolter, 1998). Los metabolitos
del oxígeno (ROS intra y extracelular) se determinaron por reducción Azul de Nitro Tetrazolium
(NBT). Se utilizó la técnica de Griess para determinar los niveles de nitrito total producidos en
sobrenadante de cultivo. En aerofilia hubo una mayor producción de biofilm en TIOG que en CTS,
en todas las cepas ensayadas, posiblemente por el menor estrés oxidativo intracelular que
mostraron las células en este medio; sin embargo se observó una mayor producción de ROS y
ON en el sobrenadante de cultivo debido al microambiente reductor. En comparación, en
microaerofilia la producción de biofilm fue menor en ambos medios de cultivo, siendo menor en
CTS, con un importante incremento del estrés intracelular. Las especies extracelulares tanto de
oxígeno como del nitrógeno mostraron un importe incremento en estas condiciones de cultivo en
ambos medios.