Evaluación de la interacción de nanopartículas de plata biosintetizadas y anfotericina B frente Candida glabrata.

GALERA IL, PÁEZ PL, PARAJE MG.

Encuentro; XXI Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados.; 2022

Nano 2022

Actualmente se registra un aumento continuo en el número de cepas microbianas resistentes a múltiples fármacos. Los nanomateriales se pueden usar como nanofármacos que actúen individualmente o en forma sinérgica con compuestos ATM contra microorganismos resistentes [2]. Las nanopartículas de plata (NPAg) y la combinación de estas con ATM existentes, presentan un potencial prometedor para combatir la resistencia microbiana a los fármacos actuales. En el presente estudio, se profundizó en el sinergismo de NPAg en combinación con anfotericina B (AmB) contra Candida glabrata.Los NPAg se biosintetizaron mediante un método ecológico y la actividad antifúngica contra C. glabrata ATCC 2001 se evaluó mediante la determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria (CIM) y la Concentración Fungicida Mínima (CFM) de acuerdo con el protocolo M27-4th ed. del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). La toxicidad celular se evaluó mediante curvas de muerte fúngica, estas se realizaron determinando la supervivencia microbiana (UFC/ml) después de la exposición e incubación de los microorganismos con AmB, NPAg y la combinación sinérgica seleccionada de ensayos previos. Se compararon además, curvas de muertes partiendo de diferentes concentraciones de inoculo inicial fúngico. Se estudió cómo afecta el tratamiento ATF a la morfología celular y de colonias, a partir de microscopia óptica (MO) y microscopía electrónica de barrido (SEM).Se encontraron los mismos valores de CIM y CFM, para NPAg 0,13 pM y para AmB 2,7x105 pM. Las concentraciones ensayadas en las curvas de muerte, fueron los valores CIM de cada compuestos y la combinación sinérgica correspondiente a 0,25 CIM para NPAg + 0,125 CIM para AmB. Se encontraron reducciones significativas (≥ 2 log) en el número de UFC/ml, a las 24 h de aplicadas las 3 condiciones detalladas, en inóculos iniciales de 103 UFC/ml. En el caso de curvas de muerte que partieron de inóculos fúngicos iniciales de 106 UFC/ml, se logró una reducción significativa en la combinación sinérgica ensayada a las 48 h de aplicada la misma. Estos datos se compararon con imágenes obtenidas por MO de colonias fúngicas, obtenidas luego de aplicar las concentraciones y/o combinaciones estudiadas en la curva de muerte, las cuales evidenciaron un crecimiento menor y asimétrico de las colonias en contraste con su control. Además se corroboró por imágenes obtenidas en el SEM, las que evidenciaron una morfología celular fúngica que difería del control en tamaño y aspecto. Se demostró actividad fungicida de las NPAg biosintetizadas y de la combinación ensayada, evidenciando un posible efecto sinérgico de las NPAg y AmB. Lo que sugiere su posible aplicación como agente antifúngico y potenciando su actividad en combinación con agentes antifúngicos tradicionales.