Cuantificacion de Citoquinas por RT-PCR en leche proveniente de vacas tratadas con un modificador de la respuesta biologica

BARAVALLE C; DALLARD B; CALVINHO LF; ORTEGA HH

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica (SAIC); 2008

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica (SAIC)

Para el control de las infecciones intramamarias en bovinos, se ha contemplado la estimulaci¨®n de la respuesta inmune inespec¨ªfica por medio del uso de modificadores de la respuesta biol¨®gica (MRB). En este sentido, nos propusimos evaluar por RT-PCR la expresi¨®n de citoquinas en leche bovina en respuesta a la inoculaci¨®n intramamaria de Panax ginseng como MRB. Se recolectaron muestras de leche a las 0 hs (previa inoculaci¨®n) y a las  24, 48 y 72 hs post inoculaci¨®n (PI) con MRB [10 ml P. ginseng (3 mg/ml) por cuarto mamario] y placebo (veh¨ªculo). Se efectu¨® RT-PCR a todas las muestras utilizando primers para IL1-¦Á y ¦Â, IL-8 y TNF-¦Á. El an¨¢lisis semicuantitativo de las bandas obtenidas se llev¨® a cabo por densitometr¨ªa ¨®ptica en relaci¨®n a la cuantificaci¨®n de la expresi¨®n de un gen normalizador (¦Â-Actina). El an¨¢lisis estad¨ªstico se realiz¨® por ANOVA y test de Duncan. Las RT-PCR permitieron detectar los ARNm de las IL1 (¦Á y ¦Â), IL-8 y TNF-¦Á en todas las muestras evaluadas. La expresi¨®n de  IL1- ¦Á  fue significativamente mayor (p<0.05) a las 48 hs PI en las muestras tratadas con MRB en relaci¨®n a todos los periodos evaluados independientemente del tratamiento recibido, mientras que la expresi¨®n de IL1-¦Â fue significativamente mayor (p<0.05) en las muestras tratadas con MRB a las 24 hs con respecto a todos las muestras tratadas con placebo. Para IL-8 se hall¨® una diferencia significativa mayor (p<0.05) a las 48 horas PI en las muestras tratadas con MRB con respecto a las tratadas con placebo. Aunque la expresi¨®n de la IL-8 fue menor a las 72 hs en relaci¨®n a las muestras tratadas con MRB, a las 48 hs no se observaron diferencias significativas entre estos periodos. Para TNF-¦Á no se encontraron diferencias significativas entre todos los grupos evaluados. Podemos concluir que el MRB utilizado (P.ginseng) estimul¨® la s¨ªntesis de citoquinas pro-inflamatorias, lo que podr¨ªa sugerir un efecto protector en la gl¨¢ndula mamaria bovina promoviendo la inmunidad inespec¨ªfica.