La Glicoprote¨ªna Especifica del Embarazo de tipo 1a (PSG1a) modula la activaci¨®n de c¨¦lulas dendr¨ªticas y condiciona la respuesta de Li T CD4+

MARTINEZ, FERNANDO; KNUBEL, C; SANCHEZ, MARIA CECILIA; MOTRAN, CLAUDIA C

La Falda, Cordoba

Congreso; LVI Reunion Cientifica de la Sociedad Argentina de Inmunologia y XI Jornadas del Grupo Rioplatense de Citometria de Flujo.; 2008

Sociedad Argentina de Inmunologia

PSG1a es la principal isoforma de las PSGs en la circulaci¨®n materna durante el embarazo. Hemos demostrado que rec-PSG1a presente en el sobrenadante de cultivo (SC) de c¨¦lulas de mam¨ªferos infectadas con un virus vaccinia recombinante que expresa PSG1a (vac-PSG1a), modula la activaci¨®n de CPAs condicionando la respuesta espec¨ªfica de c¨¦lulas T. El objetivo de este trabajo fue purificar rec-PSG1a y evaluar su capacidad para modular la activaci¨®n de c¨¦lulas dendr¨ªticas (CDs) y condicionar la respuesta especifica de Li T CD4+. Para ello el SC de c¨¦lulas J774 infectadas con vac-PSG1a fue separado por FPLC utilizando una columna de exclusi¨®n molecular (Superdex 200). La pureza de la rec-PSG1a obtenida se evalu¨® utilizando coloraci¨®n con AgNO3 y su concentraci¨®n se determin¨® utilizando un m¨¦todo fluorom¨¦trico (Quant-iT). Posteriormente se evalu¨® la expresi¨®n de marcadores de superficie y los niveles de citoquinas secretadas por CDs derivadas de m¨¦dula ¨®sea de ratones BALB/c incubadas por 18 hs con rec-PSG1a. rec-PSG1a indujo un aumento en la producci¨®n de IL-6 (p<0,03) y TGF-¦Â (p<0,03) mientras que no se observaron diferencias significativas en los niveles de IL-12, IL-10 ni en los marcadores de superficie MHC-II, CD80, CD86, ICAM-1 y CD40. Para determinar la participaci¨®n de PSG-CD en la instrucci¨®n de la RI, PSG-CD o med-CD se cultivaron con Li T CD4+ purificados de bazo de ratones DO11.10 (relaci¨®n T:CD=5) en presencia del p¨¦ptido OVA323-339. Luego de 5 d¨ªas, se evaluaron la frecuencia de c¨¦lulas CD4+CD25+Foxp3+ (nTreg o iTreg) y CD4+CD25+IL-10+ (Tr1) y los niveles de citoquinas secretadas luego de la reestimulaci¨®n con anti-CD3/CD28. Las PSG-CD, respecto a med-CD, fueron capaces de estimular la proliferaci¨®n de c¨¦lulas CD4+CD25+Foxp3+ (10.7 % vs 4.7%) mientras que no se observaron diferencias significativas en la poblaci¨®n Tr1. Adem¨¢s, PSG-CD fueron capaces de generar Li T capaces de secretar mayores niveles de IL-4 (p<0.02), IL-5 (p<0.05), IL-10 (p<0.003) e IL-17 (p<0.006) que las med-CD. Nuestros datos demuestran que PSG1a instruye CD hacia un fenotipo inductor de c¨¦lulas Th2 y Treg importantes durante el embarazo normal. Por otro lado, se ha demostrado que IL-17 se expresa en placenta y se postula que cumplir¨ªa un importante rol en la angiogenesis y/o inmunoregulaci¨®n durante las primeras etapas del embarazo. PSG1a podr¨ªa estar contribuyendo a la estimular la secreci¨®n de IL-17 por Li T de placenta.