IFIBA   22255
INSTITUTO DE FISICA DE BUENOS AIRES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Microscopía de Fuerza de Tracción: una nueva herramienta para cuantificar interacciones célula-sustrato
Autor/es:
LORENA SIGAUT; MICAELA BIANCHI; LÍA I PIETRASANTA
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Conferencia; Latin American Conference On Mathematical Modeling Of Biological Systems; 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofísica, FCEN-UBA, LAFEBS, CELFI
Resumen:
Las células detectan, procesan y traducen la información mecánica que es proporcionada por el medio ambiente extracelular para tomar decisiones sobre el crecimiento, la motilidad y la diferenciación. Para ello, las células sensan activamente la rigidez de su entorno, ejerciendo fuerzas de tracción a través de estructuras especializadas denominadas adhesiones focales, que unen físicamente componentes del citoesqueleto con la matriz extracelular. Las fuerzas de tracción son cruciales para el mantenimiento de la forma celular, la migración y la mecanotransducción; y juegan un rol importante en muchos procesos biológicos, como por ejemplo cicatrización, inflamación, embriogénesis o metástasis. Contar con una herramienta, con la sensibilidad capaz de medir las fuerzas de tracción ejercida por las células es fundamental para estudiar dichos procesos.En ese sentido, la Microscopía de Fuerza de Tracción (TFM) es una técnica que permite cuantificar las fuerzas de tracción generadas por una célula adherida a un sustrato elástico, a partir del análisis de imágenes de nanomarcadores fluorescentes embebidos en el sustrato que actúan como referencia. En esta charla se presentará el análisis de TFM aplicado a células de epitelio mamario de ratón cultivadas en diferentes sustratos con el fin de estudiar los efectos de la elasticidad del sustrato en la generación de fuerzas. Si el sustrato es suficientemente blando, la tensión que ejerce la célula lo deforma entre decenas y centenares de nanómetros, y mediante el análisis de velocimetría por imágenes de partículas (PIV), es posible calcular el campo de deformaciones del sustrato a partir de las imágenes de fluorescencia. Para obtener las fuerzas de tracción es necesario resolver un problema inverso de mecánica de medios continuos, en este caso se emplea un método de Regularización de Tikhonov para estimar los mapas de fuerzas de tracción, a partir de la deformación del sustrato y sus propiedades elásticas.