Construcción de los perfiles proteómicos y análisis de las proteínas diferencialmente expresadas en el cuádruple mutante phyA phyB cry1 cry2 de Arabidopsis thaliana

FOX ANA ROMINA, MUSCHIETTI JORGE, MAZZELLA MARIA AGUSTINA

LA PLATA

Congreso; xxviii REUNION ARGENTINA DE FISIOLOGIA VEGETAL; 2010

Los fitocromos, phyA y phyB; y los criptocromos, cry1 y cry2, son los cuatro fotorreceptores más importantes que controlan el crecimiento y desarrollo por la luz de las plantas. El acoplamiento de estos fotorreceptores a distintos programas del desarrollo genera una compleja red de señalización, que además interactúan con otros caminos de señalización, como aquellos iniciados por los azúcares. La técnica de geles bidimensionales provee información sobre la abundancia de una proteína y sus modificaciones postraduccionales. Con el objetivo de estudiar el perfil proteómico del cuádruple mutante phyA phyB cry1 cry2 comenzamos con la obtención y comparación de los proteomas específicos del genotipo salvaje y cuádruple mutante de plántulas de Arabidopsis crecidas durante diez días a la luz y en respuesta a la adición o no de sacarosa. Las muestras de proteínas totales corridas en un rango de pH 3-10 y 7cm mostraron alta reproducibilidad entre las muestras independientes. El análisis de factor de proyección mostró que los perfiles globales de proteínas no se modificaron por la presencia de sacarosa pero sí por las mutaciones phyA, phyB, cry1, y cry2. El análisis estadístico mostró 43 spots expresados diferencialmente (p<0,05), 19 cuya expresión fue mayor y 24 cuya expresión fue menor en el genotipo salvaje comparado con el cuádruple mutante. Doce spots fueron ya identificados por espectrometría de masa. Las ocho proteínas subexpresadas en el cuádruple mutante localizan en cloroplastos, mitocondrias y peroxisoma, y participan en la fotorespiración y respiración. De las cuatro proteínas sobreepresasdas en el cuádruple mutante dos estarían involucradas en estrés. El estudio de los mutantes en estas proteínas permitirá entender su función en la fototransduducción de señales. Complementariamente, el análisis de las proteínas nucleares y los fosfosproteomas están siendo analizados.