Localización de c-Fos y expresión de isoformas del receptor de estrógenos (REalfa) en un modelo de tumores mamarios en rata

ALICIA GUTIÉRREZ, LORENA SAMBUCO, LAURA ALVAREZ, ELSA ZOTTA, GABRIELA MARTIN, ANDREA RANDI

Jornada; XXXIII Jornadas Multidisciplinarias De Oncología. Instituto de Oncología Ángel Roffo; 2018

El cáncer de mama es la principal causa de mortalidad en mujeres a nivel mundial. Previamente desarrollamos tumores mamarios inducidos por N-nitroso-N-metil urea (NMU) en rata, un buen modelo para estudiar las diferentes etapas de la carcinogénesis. El c-Fos como parte del AP-1 nuclear está asociado a proliferación celular, sin embargo la función del c-Fos citosólico está en discusión. El REα actúa como coactivador aumentando la actividad de AP-1. La isoforma de 46 kDa del REα expresada en glándula mamaria y en cáncer mamario interfiere con la función de transcripción de la isoforma salvaje de 66 kDa. El objetivo de este trabajo fue estudiar la expresión y localización de c-Fos, su relación con las isoformas del RE-α (46 and 66 kDa), y los niveles de expresión de AP-1 en un modelo de tumores mamarios en ratas. Ratas hembras fueron inyectadas con NMU (50 mg/kg) a los 50, 80 y 110 días de vida y cuando los tumores alcanzaron 1 cm, la mitad de las ratas fueron ovariectomizadas. Si los tumores regresaban, se consideraron hormono-dependientes (HD), y si no regresaban, hormono independientes (HI). Los tumores de animales no ovariectomizados se usaron como controles, llamados tumores intactos diferenciados (TId) y no diferenciados (TInd). En los diferentes tipos tumorales (HD, HI y TI con diferente grado de malignidad), evaluamos: a) localización de c-Fos (inmunohistoquímica, IHQ), b) expresión de AP-1 (inmunoprecipitación de fosfo-Ser69-c-Jun, y Western Blot, WB), c) niveles de isoformas del REα de 66 y 46 kDa (WB), d) proliferación celular por PCNA (IHQ), y d) niveles de expresión de ARNm de β-caseína (RT-PCR). Resultados: c-Fos presenta diferente localización según el tipo tumoral: en TId: citosol 30%, nuclear 20%; TInd: citosol 15%, nuclear 75%; HD: citosol 39%, nuclear 22%, HI: 45% citosol, 40% nuclear. Los niveles de AP-1 en TInd son significativamente mayores que en TId (180±12 vs 40±9; p