cSrc y Erk1/2 participan en la migración de células de tumor pancreático humano inducida por histamina

NORA MOHAMAD, MÓNICA TAQUEZ DELGADO, TAMARA GALARZA, FLORENCIA MAURO, GRACIELA CRICCO Y GABRIELA MARTIN

MAR DEL PLATA

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

 La transición epitelial-mesenquimática es un proceso biológico que permite a las células epiteliales adquirir características mesenquimáticas, favoreciendo l invasión y metástasis. La cSrc, una tirosina quinasa, y las Erk1/2, serina-treonina quinasas, juegan un papel prominente en la progresión tumoral a la metástasis. Previamente, en líneas celulares de adenocarcinoma pancreático PANC-1 y BxPC3 demostramos que la histamina (HA) en concentracionesentre 0,1 y1 μM aumenta la proliferación celular, la actividad gelatinolítica y la migración celular. En este trabajo se evaluó la participación de las quinasascSrc y Erk en la migración de las células PANC-1 y BxPC3 inducida por HA. Se estudió la expresión de las formas activadas de ambas quinasas (cSrc-P y Erk-P) en función del tiempo para HA entre 0,1 y 1 μM por Western Blot. La fosforilaciónde las dos proteínas aumentó a los 10 minutos en ambas líneas (p<0,05). Enlas células BxPC3 la máxima activación se observó con HA 1 μM yen PANC con 0,2μM (p<0,05). Esas concentraciones de HA produjeron una disminución de la E-cadherina en la membrana celular y un aumento de la expresión de los marcadores mesenquimáticos N-cadherina, vimentina y alfa-actina de músculo liso.En ambas líneas el PP2 10 μM, inhibidor específico de cSrc, redujo los nivelesde cSrc-P y Erk-P inducidos por HA, mientras que el PD 9805910 μM, inhibidor específico de Erk, sólo disminuyó los niveles de Erk-P(p<0,05). La activación de cSrc por HA en las células PANC y BxPC3 se corroboró por inmunofluorescencia indirecta al observarse su localización en membrana celular. Mediante el uso de cámaras de migración se determinó que el PP2 y el PD98059 bloquearon la migración celular inducida por HA ambas líneas celulares alcabo de 24 hs (p<0,01). Estos resultados evidencian la participación de lasquinasas cSrc y Erk en la vía de señalización que media la migración de lascélulas de tumor pancreático humano PANC-1 y BxPC3 por acción de la histamina.