LA FOSFORILACIÓN DE LA PROTEÍNA C-SRC MEDIA LA MIGRACIÓN DE LAS CÉLULAS MAMARIAS HUMANAS MDA MB-231 INDUCIDA POR HISTAMINA

MOHAMD NORA ; PORRETTI JULIANA; GIRARDI MARÍA PAULA; GUITÉRREZ,ALICIA; CRICCO GRACIELA; MARTÍN GABRIELA

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En trabajos previos demostramos que bajas concentraciones de histamina (HA) (≤ 1 uM) estimulan la capacidad migratoria e invasiva en la línea celular humana de carcinoma mamario MDA MB-231, mientras que concentraciones > 10 uM las inhiben. Esta acción diferencial está mediada por los diferentes niveles de peróxido de hidrógeno (H2O2) generados en el sistema.La activación por fosforilación de c-Src es crucial en la migración y la metástasis. La c-Src activada fosforila sustratos involucrados en la adhesión celular, entre ellos la beta-catenina que transloca al núcleo y regula la expresión de genes del proceso de transición epitelial-mesenquimática.El objetivo del presente trabajo fue estudiar el papel de la proteína c-Src en la respuesta migratoria inducida por HA en las células MDA MB-231.Se empleó el inhibidor específico de c-Src PP2 en una concentración (1 uM) que no afectó la proliferación celular. Utilizando cámaras de migración e insertos con poros recubiertos o no con matrigel®, se determinó que el PP2 bloqueó el efecto estimulatorio de bajas dosis de HA sobre la migración e invasión. Por western blot se observó un aumento de la fosforilación de la proteína c-Src (p < 0.05 vs control) con dosis bajas de HA y de H2O2 exógeno (0,5 uM) y una disminución (p < 0. 05 vs control) con altas concentraciones de HA y de H2O2 (5 uM). El tratamiento con catalasa revirtió los efectos de las distintas dosis de HA.Por inmunocitoquímica se evaluó la expresión de Beta catenina. Hubo un aumento de la expresión nuclear y perinuclear con HA 0.5 uM (p < 0.05 vs control), mientras que en el tratamiento combinado de PP2 con HA 0.5 uM se observó una expresión citoplasmática y nuclear de beta catenina similar a la de los controles.Nuestros resultados señalan que la histamina modula la capacidad migratoria e invasiva de las células MDA MB-231 a través de una vía de señalización poco estudiada para los GPCR que incluye la fosforilación de la c-Src por H2O2.