QUENCHING DE FLUORESCENCIA DE NUCLEÓTIDOS POR PTERINAS

GABRIELA PETROSELLI; M. LAURA D¨¢NTOLA; FRANCO M. CABRERIZO; CAROLINA LORENTE; ESTHER OLIVEROS; ANDR¨¦S H. THOMAS

Salta

Congreso; XVI Congreso Argentino de Fisicoqu¨ªmica y Qu¨ªmica Inorg¨¢nica; 2009

Sociedad Argentina de Fisicoqu¨ªmica y Qu¨ªmica Inorg¨¢nica

El estudio de las propiedades fotof¨ªsicas de las pterinas reviste inter¨¦s ya que se ha demostrado la participaci¨®n de diversos miembros de esta familia en numerosos procesos fotobiol¨®gicos. Las pterinas son ¨¢cido d¨¦biles con un pKa cercano a 8 en agua. Las dos formas ¨¢cido-base de estos compuestos presentan diferencias en su comportamiento fotoqu¨ªmico y fotof¨ªsico. En ¨¦sta comunicaci¨®n se presentan resultados de experimentos de fluorescencia estacionarios y resueltos en el tiempo. El estudio se llev¨® a cabo en un equipo de single photon counting sobre soluciones de pterina (PT), 6-metilpterina (MPT), 6-hidroximetilpterina (HMPT) y dimetilpterina (DMPT). Como quenchers se utilizaron nucle¨®tidos pur¨ªnicos (dAMP y dGMP) y pirimid¨ªnicos (dCMP). Del an¨¢lisis realizado sobre las medidas estacionarias y resueltas en el tiempo, puede deducirse que el quenching observado en presencia de los nucle¨®tidos pur¨ªnicos posee tanto una contribuci¨®n est¨¢tica como din¨¢mica. Por otro lado, en presencia de dCMP se observa que el quenching de la fluorescencia de las pterinas estudiadas es exclusivamente din¨¢mico. A partir de las gr¨¢ficas de Stern-Volmer se obtuvieron las constantes de velocidad de quenching de fluorescencia (kq)(utilizando los correspondientes tiempos de vida de fluorescencia (¦ËF)[1]) y las constantes de formaci¨®n de complejo (Ks).[2] Se estudi¨® tambi¨¦n la influencia del pH. Para ello se realizaron experimentos a pH 5,5 y 10,5. Los resultados muestran que en medio alcalino, la interacci¨®n entre las pterinas y los nucle¨®tidos es menor. A pH 10,5 tanto los nucle¨®tidos como las pterinas poseen carga negativa, por lo tanto es l¨®gico que la interacci¨®n entre ambas mol¨¦culas sea menor. [1] Lorente C. y Thomas A. H. Acc. Chem. Res., 39, 395-402, 2006 [2] Lakowicz J. R., Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3 Ed. Springer (2006).