Produccion de H2O2 en la Oxidacion de Nucleótidos Purínicos Fotoinducida por Pteridinas

M. PAULA DENOFRIO; GABRIELA PETROSELLI; M. LAURA DÁNTOLA; FRANCO M. CABRERIZO; ANDRÉS H. THOMAS; CAROLINA LORENTE

La Plata

Congreso; Sexto Encuentro Nacional De Investigadores En Temas Relacionados Con Sustancias Peroxídicas (6º ENISP); 2010

Introducción. La radiación solar es perjudicial para los seres vivos por ocasionar daños a biomoléculas tales como nucleótidos y ADN. La radiación UV-B (280-320 nm) es absorbida por estas moléculas y las daña en forma directa. Sin embargo, la radiación UV-A (320-400 nm), que no es absorbida por estas biomoléculas, también les ocasiona daño por mecanismos fotosensibilizados. Dichos mecanismos requieren de un fotosensibilizador que absorba radiación UV-A. Las pteridinas son un grupo de compuestos heterocíclicos orgánicos presentes en las células, que participan en relevantes funciones biológicas. Estos compuestos presentan dos bandas de absorción, con la banda de menor energía centrada entre 320 y 360 nm. Objetivo.             Estudiar la producción de H2O2 en la oxidación de nucleótidos fotosensibilizada por pteridinas. Parte experimental. Fotosensibilizadores: lumazina (2,4(1H,3H)-diona; Lum) y pterina (2-amino pterinidin-4(3H)-ona; Ptr). Provistos por Schircks. Moléculas blanco: 2’-desoxiadenosina-5’-monofosfato (dAMP) y 2'-desoxiguanosina-5'-monofosfato (dGMP). Provistos por Sigma-Aldrich.             Las reacciones fotosensibilizadas se monitorearon mediante el empleo de espectroscopía UV-VIS, HPLC, medidas electroquímicas de O2 disuelto y determinación de H2O2 usando un método enzimático colorimétrico (Wiener Laboratorios S.A.I.C.). Resultados y conclusiones. Se irradiaron soluciones acuosas de conteniendo una pteridina y un nucleótido con luz UV-A, a diferentes valores de pH. En todos los casos se identificó al H2O2 como producto de reacción. Se analizó el mecanismo por el cual las oxidaciones ocurren, y se concluyó que tanto para Lum, como para Ptr, el mecanismo predominante es un proceso de transferencia de electrones. En este mecanismo (Esquema), la excitación del sensibilizador es seguida de la transferencia de un electrón desde el estado fundamental del nucleótido (dNMP) al estado triplete excitado del sensibilizador, con la formación de los correspondientes radicales (Sens•– y dNMP•+). En el paso siguiente, el Sens•– le transfiere un electrón al O2 regenerando Sens y formando anión superóxido (O2•–), el cual puede reaccionar con dNMP•+ para regenerar dNMP o con su ácido conjugado (HO2•) para formar H2O2. Referencias. R. M. Tyrrell, S. M. Keyse, J. Photochem. Photobiol. B: Biol. 1990, 4, 349. G. Petroselli; R. Erra-Balsells; F. M. Cabrerizo; C. Lorente; A. L. Capparelli; A. M. Braun; E. Oliveros; A. H. Thomas, Org. Biomol. Chem. 2007, 5, 2792. G. Petroselli; M. L. Dántola; F. M. Cabrerizo; A. L. Capparelli; C. Lorente; E. Oliveros; A. H. Thomas, J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 3001. M. P. Denofrio; S. Hatz; C. Lorente; F. M. Cabrerizo; P. R. Ogilby; A. H. Thomas, Photochem. Photobiol. Sci., 2009, 8, 1539.