Empleo de fosfotriesterasas en la síntesis de dialquilfosfatos derivados de nucleósidos,

LUCAS DETTORRE; ELIZABETH LEWKOWICZ; ADOLFO IRIBARREN

Montevideo

Congreso; IV Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones,; 2010

Universidad de la Republica

Numerosos análogos de nucleósidos pirimidínicos y purínicos han resultado ser efectivos en el tratamiento de enfermedades virales y neoplásicas. Para que dichos compuestos presenten actividad, es necesario que se conviertan intracelularmente en sus trifosfatos correspondientes. Debido a que la actividad de nucleósidos libres está limitada por un primer paso de fosforilación enzimática, se ha demostrado que el potencial terapéutico de estos compuestos puede ser mejorado mediante el empleo de nucleósidos monofosfato (NMP) en los cuales las cargas negativas del fosfato se encuentren enmascaradas con distintas funciones. Este enfoque, conocido como diseño de prodrogas de nucleótidos (pronucleótidos o ProTides), presentaría dos beneficios: por un lado, un aumento de su lipofilicidad respecto del nucleótido parental mejoraría su capacidad de atravesar las membranas celulares, y por el otro, la liberación intracelular del nucleósido 5?-monofosfato permitiría esquivar el primer paso limitante de fosforilación mediado por quinasas en el anabolismo de los trifosfatos respectivos. Se ha observado que, por ejemplo, los 5?-dialquil derivados de 3-deaza-ddA presentan actividad contra el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV), mientras que el nucleósido parental es inactivo. Con la finalidad de efectuar una primer aproximación a la síntesis de pronucleótidos a través de reacciones biocatalizadas, hemos explorado el empleo de la fosfotriesterasa de Brevundimonas diminuta en la preparación de dialquil derivados nucleósidos. En este sentido, se discutirán los resultados obtenidos empleando distintos nucleósidos como sustratos y algunos fosfotriesteres activados como dadores de fosfato. Además, se analizarán condiciones de reacción tales como solventes, relaciones molares nucleósido/donor de fosfato y concentraciones absolutas empleadas de estos reactivos.