Sintesis de nucleosidos purinicos y pirimidinicos utilizando sistemas enzimaticos co-inmovilizados

PAOLA BIANCHI; MARISA TAVERNA PORRO; ELIZABETH LEWKOWICZ; JAVIER MONTSERRAT; ADOLFO IRIBARREN

Montevideo

Congreso; IV Encuentro Regional de Biocatalisis y Biotransformaciones; 2010

Univeridad de la Republica

Una de las reacciones biocatalíticas más empleadas en la síntesis de nucleósidos y sus análogos es la transglicosidación, proceso en el cual se acoplan las actividades de las purín nucleósido fosforilasas (PNPs) con las pirimidín nucleósido fosforilasas (PyNPs) utilizando un nucleósido pirimidínico como donor glicosídico y una base purínica como aceptor . Esta metodología presenta limitaciones en la síntesis de nucleósidos modificados en el azúcar y en la síntesis de nucleósidos pirimidínicos. Por este motivo se han evaluado nuevas rutas de preparación. Una alternativa para este problema involucra el acoplamiento de las NPs con una enzima denominada fosfopentomutasa (PPM), que cataliza la transferencia estereoselectiva de un grupo fosfato entre los hidroxilos de las posiciones 5 y 1 de la ribosa, desoxirribosa y análogos . Esta aproximación tiene la ventaja de utilizar furanosas 5-fosfato (F-5-P) como materiales de partida, que son más sencillas de preparar y son más estables que las correspondientes α-F-1-P. La F-1-P es generada in situ a partir de la F-5-P, la cual es sustrato de la NP para la posterior reacción de acoplamiento con la base. En el presente trabajo se decidió sintetizar desoxirribósidos de timidina y 5-fluoruracilo, y ribósidos de hipoxantina, adenina, 6-mercaptopurina y 1,2,3-triazol-3-carboxamida utilizando la metodología acoplada de PPM/timidín fosforilasa (TP) y PPM/PNP respectivamente. Con el objetivo de mejorar la estabilidad y ampliar las aplicaciones de esta estrategia se co-inmovilizaron las enzimas en sistemas de sol-gel de sílica.