Síntesis de 5’-dimetilfosfato de inosina mediante estrategias enzimáticas y químicas

LUCAS DETTORRE; JULIETA BERTANA LAHOURCADE; ELIZABETH LEWKOWICZ; ADOLFO IRIBARREN

Carlos Paz

Simposio; XVIII Simposio Nacional de Qca. Orgánica; 2011

Sociedad Argentina de Investigaciones en Química Orgánica

Diversos análogos de nucleósidos han resultado ser efectivos en el tratamiento de enfermedades virales y neoplásicas debido a que actúan interrumpiendo la replicación de ácidos nucleicos. No obstante, se ha demostrado que la actividad de muchos de ellos está limitada por un primer paso de fosforilación enzimática, razón por la cual la administración directa de nucleósidos libres puede resultar inconveniente. El potencial terapéutico de estos compuestos puede ser mejorado mediante el empleo de nucleósidos monofosfato (NMP) en los cuales las cargas negativas del fosfato sean enmascaradas con distintas funciones. Este enfoque, conocido como diseño de prodrogas de nucleótidos (pronucleótidos o ProTides) 1 , presentaría dos beneficios: por un lado, mejoraría la capacidad del derivado de atravesar las membranas celulares debido a un aumento de su lipofilicidad respecto del nucleótido parental, y por el otro, la liberación intracelular del nucleós ido 5’-monofosfato permitiría eludir el primer paso limitante de fosforilación mediado por quinasas en el anabolismo de los trifosfatos respectivos. Se ha observado que, por ejemplo, los 5’-dialquil derivados de 3-deaza-ddA presentan actividad contra el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV), mientras que el nucleósido parental es inactivo. 2 Con la finalidad de llevar a cabo una primer aproximación a la síntesis de pronucleótidos por medio de reacciones biocatalizadas, hemos estudiado el uso como biocatalizadores de fracciones parcialmente purificadas de la fosfotriesterasa de Brevundimonas diminuta así como de la enzima sobreexpresada en Escherichia coli. En este sentido, se discutirán los resultados obtenidos empleando inosina como sustrato y metilparaoxón como dador de fosfato. Se analizarán condiciones de reacción tales como solventes, relaciones molares nucleósido/donor de fosfato y concentraciones absolutas empleadas de estos reactivos. Paralelamente, se llevará a cabo la síntesis química del producto de la biotransformación, el 5’-dimetilfosfato de inosina