Obtención de guanosinas mediante reacciones de transglicosilacion y desaminacion enzimatica

MÉDICI,R.; HERNANDEZ, M.; LEWKOWICZ, E. E IRIBARREN A. M

Rosario, Santa Fe

Congreso; XIV Simposio Nacional de Qca. Orgánica; 2003

saiqo

Los análogos de nucleósidos han sido extensamente utilizados en terapias antivirales y contra el cáncer. Nuestro laboratorio ha estudiado la síntesis de nucleósidos purínicos en reacciones de un paso utilizando células enteras como catalizadores. La reacción se realiza utilizando nucleósidos pirimídinicos como donores de pentosa y bases purínicas como aceptor por acción de nucleosido fosforilasas. En particular la obtención de guanosinas se ve desfavorecida dada la baja solubilidad de la guanina. La adenosín deaminasa cataliza la hidrólisis específica de diversos sustituyentes en la posición 6 de la base purínica, entre ellos, amino, halógenos, alcoxilos. Por acción de esta enzima, es posible obtener guanosina3 a partir del 2,6 diaminopurinribósido lo cual representa una ventaja debido a que la 2,6-diaminopurina, la base correspondiente, es más soluble que la guanina en el medio de reacción. Por lo antes descripto, se decidió abordar la síntesis de guanosina y desoxiguanosina mediante dos métodos alternativos. En el primero se utilizan uridina o timidina y guanina, sometiendo a las células enteras a condiciones extremas de pH, a fin de favorecer la solubilidad de la base. En el segundo método, se utiliza una combinación de una reacción de transglicosilación y una de desaminación, utilizando uridina o timidina y 2,6-diaminopurina, a fin de sintetizar 2,6-diaminopurinribósido y 2,6-diaminopurindesoxirribósido respectivamente. Las reacciones se realizaron a 60ºC o 45ºC, en presencia de fosfato inorgánico, los sustratos correspondientes y los microorganismos seleccionados a través de screenings. Los mejores resultados se obtuvieron con Aeromonas hidrophila para la síntesis de 2,6-diaminopurinribósido, con un porcentaje de conversión del 88%, mientras que Escherichia coli BL21, fue seleccionada para la obtención de 2,6-diaminopurindesoxiribósido con un porcentaje de conversión de 85%. Las producción de guanosina y desoxiguanosina se realizó por acción de la adenosín deaminasa, pudiéndose utilizar células enteras o enzimas aisladas.