Aplicaciones de BioMSId: identificación de inhibidores en mezclas

RAMALLO, IA; SALAZAR, MO; GARCIA, P; CABEZUDO, I; ALONSO, V; FURLAN RLE

San Luis

Congreso; IV Congreso Argentino de Espectrometría de Masa; 2022

Sociedad Argentina de Espectrometría de Masa

En este trabajo se demuestra a través de aplicaciones la capacidad de BioMSId1 para laidentificación de inhibidores en mezclas. BioMSId combina la habilidad de la bioautografía acopladaa cromatografía en capa delgada (CCD) para detectar in situ estructuras bioactivas, con lacapacidad de la espectrometría de masa para identificar moléculas. De esta forma, se estableceuna rápida conexión entre actividad inhibitoria e identidad del compuesto activo.El método se basa en que la composición química no vinculada con la bioactividad en un halo puede ser distinta en CCDs de la misma muestra en diferentes condiciones. La comparación entreespectros permite la detección de iones comunes, y la identificación del compuesto activo.Se estudio la inhibición sobre acetilcolinesterasa de Ilex paraguariensis Saint-Hilaire. Medianteinfusión directa en un equipo Bruker micrOTOF-Q II (Bruker-Daltonics), se hallaron dos valoresrelacionados al halo: 195,0878 m/z [M+H]+ y 217,0700 m/z [M+Na]+. Los mismos se vincularon a la fórmula C8H10N4O2 de la cafeína. Luego, se aplicó BioMSId para estudiar la inhibición sobre xantina oxidasa del aceite esencial bromado de Foeniculum vulgare Mill. Mediante infusión directa en un equipo Bruker micrOTOF-Q II (Bruker-Daltonics) se identificaron dos valores para el halo deinhibición: 243,0015 m/z [M+H]+ y 264,9835 m/z [M+Na]+ verificados para la fórmula C10H11BrO2 del 2-bromo-1-(4-metoxifenil) propan-1-ona, derivado bromado del anetol. Finalmente, se empleóBioMSId para estudiar la inhibición sobre tirosinasa de una biblioteca combinatoria detio(semi)carbazidas. Mediante infusión directa en el equipo TSQ Quantum Access Max (QQQ)(Thermo-Scientific) se logró vincular el halo de inhibición al valor 267,12 m/z que correspondía laseñal [M+H]+ del compuesto A7T1 de la biblioteca.BioMSId puede ser exitosamente aplicado para analizar cualquier tipo de extracto activo, frente adiferentes blancos biológicos, y con datos de espectrometría de alta y baja resolución, facilitando la identificación de compuestos bioactivos en mezclas, incluso cuando son constituyentes minoritarios.