Nuevo Método Autográfico para la Detección de Inhibidores de Xantin Oxidasa y Captadores de Radical Superóxido

RAMALLO, IA; ZACCHINO, SA; FURLAN, RLE

San Miguel de Tucuman

Congreso; XIII Jornadas de Jóvenes Investigadores AUGM 2005; 2005

Asociación de Universidades Grupo Montevideo

Los extractos vegetales son una fuente importante de compuestos con potencial terapéutico. Dado que son mezclas complejas de compuestos, encontrar un extracto con  “actividad” es el inicio de un largo proceso de fraccionamiento. Esto hace útil el desarrollo de ensayos que permitan adjudicar la actividad observada al/los componentes responsables/s de la misma antes de ser separados. Esto se logra combinando la cromatografía en capa delgada (TLC) con una autografía. Se desarrolló aquí un método bioautográfico sobre TLC para detectar inhibidores de Xantina Oxidasa (XO), generadora de ácido úrico, O2.- y H2O2. Se detectó actividad XO con los reveladores fosfo-litio-túngstico, NBT, y peroxidasa-fenol-4AF. Buenos resultados se obtuvieron cubriendo la TLC con una capa de agar con XO y NBT. Inhibidores y captadores de O2.- se visualizan como puntos blancos en una matriz violeta. Estas actividades son diferenciadas por una segunda autografía que genera O2.-  no enzimáticamente por fotorreacción de la riboflavina. Los extractos vegetales son una fuente importante de compuestos con potencial terapéutico. Dado que son mezclas complejas de compuestos, encontrar un extracto con  “actividad” es el inicio de un largo proceso de fraccionamiento. Esto hace útil el desarrollo de ensayos que permitan adjudicar la actividad observada al/los componentes responsables/s de la misma antes de ser separados. Esto se logra combinando la cromatografía en capa delgada (TLC) con una autografía. Se desarrolló aquí un método bioautográfico sobre TLC para detectar inhibidores de Xantina Oxidasa (XO), generadora de ácido úrico, O2.- y H2O2. Se detectó actividad XO con los reveladores fosfo-litio-túngstico, NBT, y peroxidasa-fenol-4AF. Buenos resultados se obtuvieron cubriendo la TLC con una capa de agar con XO y NBT. Inhibidores y captadores de O2.- se visualizan como puntos blancos en una matriz violeta. Estas actividades son diferenciadas por una segunda autografía que genera O2.-  no enzimáticamente por fotorreacción de la riboflavina. Los extractos vegetales son una fuente importante de compuestos con potencial terapéutico. Dado que son mezclas complejas de compuestos, encontrar un extracto con  “actividad” es el inicio de un largo proceso de fraccionamiento. Esto hace útil el desarrollo de ensayos que permitan adjudicar la actividad observada al/los componentes responsables/s de la misma antes de ser separados. Esto se logra combinando la cromatografía en capa delgada (TLC) con una autografía. Se desarrolló aquí un método bioautográfico sobre TLC para detectar inhibidores de Xantina Oxidasa (XO), generadora de ácido úrico, O2.- y H2O2. Se detectó actividad XO con los reveladores fosfo-litio-túngstico, NBT, y peroxidasa-fenol-4AF. Buenos resultados se obtuvieron cubriendo la TLC con una capa de agar con XO y NBT. Inhibidores y captadores de O2.- se visualizan como puntos blancos en una matriz violeta. Estas actividades son diferenciadas por una segunda autografía que genera O2.-  no enzimáticamente por fotorreacción de la riboflavina.