Genotipificación de microsatélites mononucleotídicos en población argentina normal

FUNDIA AF; DE DIOS SOLER M; LARRIPA I

San Miguel de Tucumán, Pcia. de Tucumán, Argentina

Congreso; XXXVIII Congreso Argentino de Genética; 2009

SOCIEDAD ARGENTINA DE GENÉTICA

Los microsatélites mononucleotídicos BAT25  y BAT26 son secuencias repetitivas poco polimórficas en la población normal pero son inestables y presentan alelos de menor longitud en tumores con inestabilidad de microsatélites (MSI) y fenotipo mutador (RER+). La MSI se define por cambios de longitud del microsatélite del tejido tumoral respecto del normal. BAT25 (T25) está ubicado en el intrón 16 del encogen c-kit (7q) y BAT26 (A26) en el intrón 5 del gen MSH2 (2p). Ambos se consideran marcadores sensibles y específicos para diagnosticar MSI usando solo el tejido tumoral. Se han reportado variantes alélicas normales con menor número de repeticiones en algunos grupos étnicos. En este estudio se realizó la genotipificación de BAT25 y BAT26 en sangre periférica de 50 individuos sanos a fin de determinar los perfiles alélicos en nuestra población. La amplificación se realizó en 25ml con 1,5mM MgCl2, 100mm dNTPs, 0,3/0,4mM de cada primer, 1U de Taq polimerasa y  200ng de ADN genómico. La temperatura de annealing fue 48ºC para BAT25 y 55ºC para BAT26. Se efectuaron geles de poliacrilamida no desnaturalizante (15%) con nitrato de plata (0.1%). No se identificaron alelos de menor tamaño en el grupo estudiado, encontrando diferencias mínimas que oscilaron para BAT25 entre -1pb a +2 pb y para BAT26 entre -1pb a 0 pb. La ausencia de variantes alélicas confirma la naturaleza monomórfica de estos marcadores en la población Argentina, concluyendo que ambos microsatélites son indudablemente útiles para determinar MSI en el ADN tumoral de pacientes con cáncer.