EFECTO DE LA REDISTRIBUCION LIPIDICA EN DOMINIOS DE MEMBRANA (RAFT) PRODUCIDOS DURANTE LA CAPACITACION ESPERMATICA Y EN LA FERTILIZACION

BOARELLI PV.; MONCLUS MA.; DE ROSAS JC.; VINCENTI AE,; FORNES MW.

Rosario

Congreso; VII Congreso XXV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2005

Sociedad de Biología de Rosario

La maduración y capacitación espermática involucra cambios estructurales a nivel de la membrana plasmática; específicamente en unidades conocidas como dominios raft (MD); donde los componentes lipídicos principales son el colesterol (C) y los esfingolípidos (GM1), asociados a proteínas específicas. Esta reestructuración está íntimamente relacionada con la función espermática. El espermatozoide maduro (E) no puede fertilizar al ovocito sin antes capacitarse. La capacitación ocurre en el tracto genital femenino. Pero puede producirse in vitro mediante la incubación en medios de cultivos enriquecidos con albúmina de suero bovino (BSA) y bicarbonato (BC). Durante esta etapa el E pierde C y el GM1 se redistribuye desde la región acrosomal hacia la postacrosomal. Los cambios pueden ser estudiados por métodos de marcación específicos para cada componente: C con filipin III (F) (fluorescente perse) y GM1 con toxina colérica subunidad beta (CT) (Alexa Fluor®). Teniendo en cuenta que la región postacrosomal está asociada a la fertilización, el bloqueo adecuado de GM1 con CT provocaría una disminución en el binding entre E y ovocitos (O). Para su estudio se llevaron a cabo técnicas de FIV, donde E sin tratamiento con CT (control) y otros con CT (experimental) se enfrentaron a O desprovistos de zona pelúcida procedentes de hámster (binding heterólogo). Luego de un período de incubación adecuado (20 min) en medio de cultivo (HECM-3) se realizó el recuento de E adheridos a la membrana de los O. De dichos recuentos se desprende como resultado una disminución significativa de la unión E-O, evaluado estadísticamente por Test de Student. En todos los experimentos se utilizaron ratones balc machos adultos y hembras de hámster pre-puberes. En ensayos recientes, hemos iniciado el estudio de los componentes lipídicos asociados a los MD por marcación específica y los efectos sobre el binding por bloqueo de los mismos sobre el O.