INVESTIGADORES
FORNES Miguel Walter
congresos y reuniones científicas
Título:
EL TEST DE PENETRACION DEL OVOCITO DE HAMSTER. UN NUEVO METODO DE EVALUACION
Autor/es:
DE ROSAS JC.; FORNES MW.; BURGOS MH.
Lugar:
La Serena
Reunión:
Congreso; Reunión Conjunta de Sociedades de Biología, Genética, Bioquímica, Farmacología y Ciencias Fisiológicas de Chile; 1987
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Chile
Resumen:
El test de penetración del ovocito denudado de hámster es actualmente usado para evaluar el factor masculino en estudios de esterilidad humana. La determinación de la fusión de espermatozoides humanos en la superficie del oolema y la formación de pronúcleos en el interior del citoplasma oocitario se ve dificultada por la riqueza de vacuolas y gránulos del mismo. El método habitual de evaluación del test a través de microscopía de contraste de fase o técnicas de tinción histológicas implican una considerable inversión de tiempo. Con el objeto de mejorar la cuantificación del test, se utilizó una bis-benzamida que tiene la propiedad de unirse al sitio timidina-adenina del ADN y emitir fluorescencia amarillo-verdosa a 400 nm, sin interferir la vitalidad de las células. La tinción se realiza en los últimos 30 min de la técnica habitual del test, a 37ºC y en cámara oscura. Con el empleo de este marcador, específico de ADN, se puede identificar certeramente el número de espermatozoides fusionados, cabezas dispersas y el número de pronúcleos masculinos formados en el interior del citoplasma del ovocito.
