REGULADORES DE LA REACCION ACROSOMAL EN ESPERMATOZOIDES DE MAMIFEROS

DOMINGUEZ LA.; DIAZ A.; MAYORGA LS.; FORNES MW.

Mendoza

Simposio; Simposio: El factor masculino en infertilidad. Aspectos básicos y clínicos; 1994

Universidad Nacional de Cuyo

La reacción acrosomal (RA) es actualmente concebida como una exocitosis. En este sentido las proteínas G y proteínas de la vía de las fosfolipasas, ambas presentes en el mecanismo de la exocitosis, han sido también identificadas en el proceso de la RA. En el presente trabajo se estudiaron en espermatozoides (E) humanos: a) moduladores de las proteínas G (G): péptidos sintéticos degranulantes de mastocitos: HR1 (agonista), HR2 (análogo sin efecto biológico); GTP-g-S (análogo del GTP), b-GDP (antagonista de GTP) y 48/80, cloruro de benzalconio e hiamina (con efectos aún no claramente definidos sobre la G); b) metabolito activo de la vía de la fosfolipasa: Lisofosfatidilcolina (LPC). En E de rata se estudió la acción de iones Ca++, K+, GTP-g-S y LPC. Como control se utilizó el ionóforo de Ca++ (A23187). La RA se definió por Triple Tinción (TT) (E humanos y de rata), por la liberación de fosfatasa ácida (FA) (E de rata) y microscopía electrónica de transmisión (TEM) y barrido (SEM) (E de rata). Los E humanos de espermogramas normales fueron recuperados por la técnica de swimm-up y capacitados en medio Menezo B2 por 3 hs a 36ºC en 5% CO2. Se incubaron 15 min adicionales en presencia de los moduladores y se procesaron para TT. Los E de rata aislados de cola de epidídimo fueron incubados por 5 hs en un medio derivado de Menezo B2, a 36ºC, bajo vaselina. Se adicionó los reactivos en esudio por 30 min y luego se procesó para determinación de FA y TEM ? SEM. Se encontró que el LPC, GTP-g-S y HR1 produjeron el mayor porcentaje de E humanos vivos y reaccionados. Además, se corroboró en E de rata la acción positiva de los iones en la RA. Asimismo, LPC y GTP-g-S provocaron mayor porcentaje de liberación de FA en comparación con el ionóforo. Estos resultados se corroboraron en el análisis por TEM y SEM en E de rata. Se propone que las vías de activación de proteína G y Fosfolipasa/s estarían involucradas en la RA del espermatozoide de mamíferos, como se demuestra por el efecto de los moduladores usados cuya acción es similar en otros tipos de exocitosis.