Evaluación de la calidad microbiológica, inocuidad, actividad inmunoestimulante y antiviral de escleroglucano producido por Sclerotium rolfsii ATCC 201126

CASTILLO NA; CASTILLA V; FARIÑA JI

Lima

Congreso; IX Congreso Latinoamericano de Micología; 2017

Asociación Latinoamericana de Micología

El escleroglucano es un β-glucano de elevado peso molecular producido por hongos del género Sclerotium. Numerosos trabajos afirman que posee múltiples propiedades medicinales, proponiendo su uso en alimentos funcionales, nutracéuticos y vacunas. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la calidad, inocuidad, y efectos inmunoestimulante y antiviral del biopolímero escleroglucano producido en nuestro laboratorio por cultivo sumergido con Sclerotium rolfsii ATCC 201126. Se determinó grado de pureza (% de carbohidratos totales, reductores y proteínas), contenido de levaduras, mohos y bacterias, concentración de endotoxina (test LAL) y efecto citotóxico sobre células Hep-2, RAW 264.7 y Vero (test MTT). Se visualizó la internalización del exopolisacárido, EPS (derivatizado con FITC) en células RAW 264.7 mediante microscopía de fluorescencia. Se investigó el efecto del EPS sobre actividad fagocítica y microbicida de polimorfonucleares (PMN) y células RAW 264.7 incubadas con polímero y posteriormente con Saccharomyces cerevisiae, determinándose % de fagocitosis, índice fagocítico y % de lisis de levaduras fagocitadas. Finalmente se determinó el % de inhibición de la replicación de los virus herpes simplex (HSV) y de la estomatitis vesicular (VSV) en células Vero incubadas con el polímero a diferentes tiempos post-infección. El polímero presentó excelentes propiedades químicas y microbiológicas (>95% de carbohidratos totales, no se aislaron hongos ni bacterias). Los niveles de endotoxina en soluciones de EPS fueron bajos (0.73 ±0.03 UE/mL para 100 µg EPS/mL y 1.36 ± 0.21 UE/ml para 200 µg EPS/mL). Concentraciones entre 25-200 µg/mL resultaron inocuas sobre las líneas celulares ensayadas. Se visualizó fluorescencia en el interior de las células incubadas con EPS-FITC, observándose distribución citoplasmática homogénea a los 30 min y localización adyacente al núcleo luego de 1 y 3 h de incubación. El tratamiento con EPS (50 y 100 µg/mL) aumentó la actividad fagocítica en células RAW 264.7 comparadas al control no tratado (13% y 9% vs. 2%), no así en PMN. El EPS inhibió la replicación de HSV pero no tuvo efecto contra VSV. Las cualidades evidenciadas, aunque preliminares, resultan de alto valor y orientan hacia la búsqueda de posibles aplicaciones biotecnológicas y biomédicas.