AVANCES EN LA TIPIFICACIÓN GEN-ESPECÍFICA DEL MHC EQUINO

DIAZ S; MANGANARE MM; PERAL GARCIA P; GIOVAMBATTISTA G

San Miguel de Tucuman

Congreso; XXXVIII Congreso Argentino de Genetica; 2009

Sociedad Argentina de Genética

Los genes del Complejo Principal de Histocompatibilidad (MHC) son excelentes marcadores moleculares para estudios poblacionales, evolutivos y de asociación con enfermedades infecciosas y autoinmunes, pero en equinos los sistemas de tipificación no están estandarizados. Dentro del MHC, los genes multicopia DRB son altamente variables en el dominio proteico de interacción con antígenos, codificado en el exón 2. En equinos se reportaron tres genes DRB funcionales y 20 alelos, los cuales no se asignaron a un gen específico, y los métodos de detección disponibles no discriminan entre las diferentes copias génicas. Se caracterizaron las secuencias comprendidas entre el promotor y el exón 3 para comparar las copias de los genes ELA-DRB con el fin de desarrollar métodos de tipificación gen-específico. En base a las secuencias genómicas reportadas en el Genoma Equino se diseñaron 13 cebadores que combinados permiten amplificar subregiones dentro de esta zona en 15 caballos de diferentes razas equinas. Las secuencias de los productos de amplificación se determinaron por secuenciación directa. Los resultados obtenidos demostraron que: 1) existen mas de tres genes DRB y pseudogenes; 2) se asignaron los alelos reportados a los genes DRB2, DRB3 y DRBy1;  3) no se pudo detectar la presencia del gen DRB1 en los animales analizados; 4) se describen nuevos alelos del promotor y de los exones 2 y 3; y 5) se reporta la presencia de un microsatélite en el intrón 2 proximal. La información obtenida permitió el desarrollo de métodos de tipificación específicos para los genes DRB2 y DRB3.