Evaluación del antígeno triparredoxina peroxidasa citosólica de Trypanosoma cruzi como candidato vacunal y de diagnóstico para la enfermedad de Chagas

POATO ALEXIA; CABRERA GABRIEL; ARIAS DG; PEVERENGO L; GUERRERO SA; BONTEMPI I; PROCHETTO E; MARCIPAR IVÁN

Santa Fe

Congreso; SAP XXVIII Reunión Anual; 2016

La Triparredoxina Peroxidasa citosólica (CPX) de Trypanosoma cruzi, es un enzima clave del sistema dependiente de T(SH)2 de dicho parásito. Este sistema participa en el mecanismo de defensa contra las especies reactivas de oxígeno (ROS) presentes en los fagosomas durante la infección, siendo clave para la supervivencia del parásito. La elevada sobreexpresión de la CPX durante la infección, como así también, la inexistencia de dicho sistema en mamíferos, la convierte en un candidato, para ser evaluado en tanto en vacunas como en diagnóstico. Para evaluarla como candidato vacunal, grupos de ratones Balb/c (n=5) fueron inmunizaron con tres dosis cada 15 días de la siguiente manera: CPX-ISPA: CPX (10 ug) + ISPA (5 ug, un adyuvante desarrollado por nuestro grupo basado en liposomas y QuilA); CPX-AF: CPX (10 ug) emulsionada con el adyuvante de Freund; CPX:CPX (10 ug) sin adyuvante y un grupo control PBS. La inmunización generó altos niveles de anticuerpos específicos previo al desafío con el antígeno CPX (P<0,05 grupos CPX-ISPA, CPXAF, CPX vs preinmune, Mann-Whitney). Además se obtuvo una relación IgG2a/IgG1 mayor a 1 para los grupos CPX-ISPA, CPX-AF. Del análisis de la reacción de hipersensibilidad retardada (DTH), únicamente el grupo CPX-ISPA presentó diferencias significativas con el grupo control (P<0,01; CPX-ISPA vs otros grupos, Mann-Whitney). 15 días de la última inmunización los grupos de ratones fueron desafiados con mil parásitos de la cepa Tulahuen. Los grupos no presentaron diferencias significativas en la parasitemia, ni en la sobrevida aunque el grupo CPX-ISPA presentó un retraso en la curva de mortalidad de dos semanas con respecto al control. El desempeño para diagnóstico se evaluómediante ELISAS indirectos. Se optimizaron las condiciones del ensayo y luego se evaluó frente a un panel de sueros positivos y negativos (n=20), caracterizado por ELISA y HAI comerciales. La especificidad y sensibilidad obtenida fue del 94 % y 47 % respectivamente, siendo correlación kappa de 0,68 (Considerable). Concluimos que la enzima CPX, presentó elevada especificidad pero débil sensibilidad para ser usada como proteína de diagnóstico. Como candidato vacunal no generó protección aunque se destaca el retardo en el inicio de la infección, parámetro que puede ser discutido como de potencial utilidad para ser coevaluada junto a otros candidatos en una formulación multicomponente.