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Entre los biopolímeros implicados en la reserva intracelular de carbono y energía encontramos polisacáridos (glucógeno y almidón) y lípidos (ácidos grasos, triacilgliceroles, ceras y poli-β-hidroxibutiratos). El glucógeno es un polímero de unidades glucosídicas unidas por enlaces α-1,4 que presenta ramificaciones unidas en α-1,6. En la síntesis, el dador glucosídico para la elongación del poliglucano es la ADP-glucosa (ADP-Glc) que es sintetizada por la ADP-glucosa pirofosforilasa (ADP-Glc PPasa, EC 2.7.7.27) constituyendo el paso limitante en la síntesis de este polisacárido. La ADP-Glc PPasa es una enzima alostérica, regulada por metabolitos provenientes de la principal vía de utilización del carbono en el organismo respectivo. La enzima ha sido estudiada principalmente en bacterias Gram-negativas pero, recientemente, los resultados obtenidos por nuestro grupo de trabajo muestran que la ADP-Glc PPasa de Gram-Positivos presenta propiedades regulatorias y/o estructurales diferentes. Rhodococcus jostii es una bacteria oleaginosa que acumula hasta un 70% del peso seco en lípidos. Es un organismo Gram-positivo de alto contenido GC en su genoma, del cual se dispone de información acerca de la utilización de lípidos como compuestos de reserva. Sin embargo, poco se conoce sobre el metabolismo del glucógeno. En ese contexto, el estudio cinético, regulatorio y estructural de la ADP-Glc PPasa, es relevante no solo para el entendimiento de las relaciones evolutivas entre las distintas ADP-Glc PPasas, sino también para realizar un análisis de sus propiedades en el contexto metabólico global del microorganismo. En este trabajo se desarrollaron herramientas moleculares para la obtención en forma recombinante de la de ADP-Glc PPasa de R. jostii, para avanzar en su caracterización cinética, regulatoria y estructural. Los estudios de caracterización de esta enzima clave en la síntesis del glucógeno, permitirán inferir acerca de los mecanismos que influyen en el flujo del carbono y la interrelación entre los distintos compuestos de reserva en estos organismos.