Evaluación del daño al ADN y su reparación inducidos por la terapia por captura neutrónica en boro (BNCT) en tiroides.

RODRIGUEZ , C; CARPANO, M; PERONA, M; THORP, S; CUROTTO, P; POZZI, E; CASAL, M; JUVENAL, G; PISAREV , M; DAGROSA, A

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunion cientifica anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2013

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

Introducción: Previamente comenzamos el estudio de los mecanismos de daño y reparación inducidos por la radioterapia con boro en células tumorales de tiroides. Observamos una diferencia tanto en la cantidad de ADN dañado como en los patrones de expresión génica de las enzimas de reparación en células irradiadas con radiación gamma, con neutrones solos y con neutrones más boronofenilalanina (BPA). El objetivo de estos estudios fue profundizar el análisis de los patrones de daño y reparación en células tumorales tiroideas irradiadas midiendo el diámetro de los focos de la histona H2AX fosforilada y la expresión de las proteínas Ku70 y Rad51, principales componentes de las vías de reparación por unión de extremos no homólogos (NHEJ) y por recombinación homóloga (HRR) respectivamente. Materiales y Métodos: se utilizaron células de la línea de carcinoma folicular de tiroides humano (WRO) en fase de crecimiento exponencial distribuidas en los siguientes grupos: 1) BPA (10 µg10B/ml) + neutrones; 2) Neutrones solos; 3) Rayos gamma. Un grupo control para cada tratamiento fue incluido. Las células fueron irradiadas en la facilidad de la columna térmica del reactor RA-3 (flujo= 1.1010 n/cm2 sec) o con una fuente de 60Co. Las irradiaciones se llevaron a cabo en diferentes lapsos de tiempo a fin de obtener una dosis física total de 3 Gy (±10%). La expresión de las enzimas Ku70 y Rad51 fue analizada por Western Blot a diferentes tiempos (2, 4, 6, 24 y 48 h) y el daño al ADN se midió por inmunofluorescencia con el anticuerpo anti H2AX. Resultados: La expresión de Rad51 aumentó a las 2 horas post-irradiación y persistió hasta 6 h solo en el grupo neutrones y neutrones + BPA (p