ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN DEL TRANSPORTADORDE BOROFENILALANINA (BPA) PARA LA OPTIMIZACIÓNDE LA TERAPIA POR CAPTURA NEUTRÓNICEN BORO (BNCT) EN MELANOMA.

ROSSINI, A ; THOMASZ, L; DAGROSA, MA; CARPANO, M; NIEVAS, S; JUVENAL, G; PISAREV , M

Mar del Plata

Congreso; LV REUNION CIENTIFICA ANUAL. Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

Introducción: En la actualidad ningún tratamiento es eficaz para melanomas en estadíos avanzados. Una alternativa podría ser la Terapia por Captura Neutrónica en Boro (BNCT), cuya efectividad se halla directamente relacionada a la captación selectiva de 10B por parte de las células tumorales. Un compuesto muy utilizado para vehiculizar el 10B dentro de las células es la p-borofenilalanina (BPA). Su captación se lleva a cabo a traves de un transportador de cuya subunidad catalítica (LAT) se han identificado 4 subunidades: LAT1/2/3 y 4, ademas de una subunidad pesada (4F2hc/CD98) con la que en algunos casos debe dimerizarse. Objetivos: Determinar la actividad de este sistema como una de las principales vías de captación de BPA. Caracterizar la expresión de las distintas subunidades que conforman este sistema de transporte en 5 líneas de melanomas humanos. Materiales y Métodos: Se utilizaron las líneas M8, A375 y NPA (M14) derivadas de melanomas cutáneos primarios y Mel-J y M1/15 derivadas de metastasis pulmonar y hepáticas respectivamente. Mel-J y M1/15 fueron incubadas con BPA en presencia y ausencia del inhibidor específico para este transportador el ácido 2-aminobicyclo [2.2.1] heptano-2-carboxylico (BCH). Se determinó la captación celular de 10B a través de mediciones con ICP-OES. Se extrajeron los RNA totales de cada una de las líneas (trizol reagent) y utilizando RT-PCR (Super Script II transcriptasa reversa) y PCR (Master Mix Promega) se obtuvieron perfiles de expresión para las líneas celulares a través de electroforesis en gel de agarosa 2% teñidos con EtBr. Resultados: Se observó un efecto inhibidor del BCH sobre la captación de BPA indicando la importancia de este sistema de transporte en la acumulación celular de BPA. Diferentes isoformas responsables de este transporte fueron co-expresadas en las diferentes líneas. La línea Mel-J co-expresó LAT1, LAT3 y 4F2hc. La línea A375 co-expresó LAT3, LAT4 y 4F2hc. La línea M1/15 co-expresó junto a 4F2hc LAT1 y LAT4. Conclusiones: Las diferentes isoformas coexpresadas serían en gran parte las responsables de la captación de BPA en las diferentes líneas. La inducción de la sobreexpresión y el aumento de actividad de estos transportadores podrían jugar un rol clave en la optimización del BNCT para el tratamiento de melanomas.