Estudio del 6-propil-2 Tiouracilo (PTU) como radioprotector en la Glándula Tiroides

PERONA, M; DAGROSA, MA; PAGOTTO, R; CASAL, M; PIGNATARO, O; PISAREV, M A; JUVENAL, GJ

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XXXV Reunión Anual de la Asociación Argentina de Tecnología Nuclear.; 2008

Asociacion Argentina de Tecnología Nuclear

Introducción: Numerosos estudios epidemiológicos han demostrado que la exposición a altas dosis de radiación externa incrementa la frecuencia de neoplasias de tiroides, particularmente cuando la misma ocurre en la niñez o en la adolescencia. Los radioprotectores son sustancias que administradas antes de la irradiación, disminuyen el daño ocasionado por la misma. El uso de radioprotectores de la tiroides sería de utilidad para evitar efectos tumorigénicos en la glándula cuando la radiación ionizante en la zona del cuello es la única terapia posible. Objetivos: Estudiar el posible efecto radioprotector de la droga antitiroidea 6 propil-2 tiouracilo (PTU). Se cultivaron células tiroideas normales (línea FRTL-5 de rata) y patológicas (líneas de cáncer humano tiroideo anaplásico ARO). Las mismas fueron irradiadas con una fuente de 60Co (1Gy/min) en dosis variables entre 1 y 8 Gy, en presencia y ausencia de PTU (0.5 y 1 mM respectivamente). A posteriori se evaluó el daño post radiación mediante el ensayo de formación de colonias tomando la fracción de sobrevida (FS) como indicador del efecto. Resultados: la FS aumentó respecto del Control en ambas líneas celulares para todas las dosis utilizadas. La relación PTU vs Control fue de 1.2 y 2.3 (3 Gy) y de 1.3 y 2.7 (5 Gy) para las células FRTL-5 y ARO respectivamente. La incubación con PTU post irradiación no modificó la fracción de sobrevida respecto del control. Dado que se ha demostrado que el aumento de la radioresistencia de los tejidos puede inducirse mediante la estimulación de las vías del AMP cíclico (cAMP), se midieron mediante RIA los niveles del segundo mensajero luego de incubar las líneas celulares durante 5, 24, 48 y 72 horas con diferentes concentraciones de PTU (0; 0.1 mM; 0.5 mM; 1 mM y 2 mM). El PTU aumentó los niveles extracelulares del cAMP en todos los tratamientos para ambas líneas. En la línea FRTL-5 hubo un aumento de los niveles extracelulares dependiente de las dosis y del tiempo. Para la línea ARO se observó un pico a las 24 hs en los niveles extracelulares incubados con PTU 1 mM de 36,97 ± 6,37 (fmol/µg de prot) vs Control 16,67 ± 3,92 (fmol/µg de prot). Posteriormente se incubaron e irradiaron ambas líneas celulares con agentes que elevan los niveles intracelulares de AMPc. El efecto radioprotector del PTU fue mimetizado por el cAMP. En la línea ARO la relación Forscolina vs Control fue de 1.7 para 1 y 5 Gy y su adición post irradiación no aumentó la fracción de sobrevida. El dibutiril AMPc no produjo cambios en las fracciones de sobrevida respecto del Control en ambas líneas celulares. Introducción: Numerosos estudios epidemiológicos han demostrado que la exposición a altas dosis de radiación externa incrementa la frecuencia de neoplasias de tiroides, particularmente cuando la misma ocurre en la niñez o en la adolescencia. Los radioprotectores son sustancias que administradas antes de la irradiación, disminuyen el daño ocasionado por la misma. El uso de radioprotectores de la tiroides sería de utilidad para evitar efectos tumorigénicos en la glándula cuando la radiación ionizante en la zona del cuello es la única terapia posible. Objetivos: Estudiar el posible efecto radioprotector de la droga antitiroidea 6 propil-2 tiouracilo (PTU). Se cultivaron células tiroideas normales (línea FRTL-5 de rata) y patológicas (líneas de cáncer humano tiroideo anaplásico ARO). Las mismas fueron irradiadas con una fuente de 60Co (1Gy/min) en dosis variables entre 1 y 8 Gy, en presencia y ausencia de PTU (0.5 y 1 mM respectivamente). A posteriori se evaluó el daño post radiación mediante el ensayo de formación de colonias tomando la fracción de sobrevida (FS) como indicador del efecto. Resultados: la FS aumentó respecto del Control en ambas líneas celulares para todas las dosis utilizadas. La relación PTU vs Control fue de 1.2 y 2.3 (3 Gy) y de 1.3 y 2.7 (5 Gy) para las células FRTL-5 y ARO respectivamente. La incubación con PTU post irradiación no modificó la fracción de sobrevida respecto del control. Dado que se ha demostrado que el aumento de la radioresistencia de los tejidos puede inducirse mediante la estimulación de las vías del AMP cíclico (cAMP), se midieron mediante RIA los niveles del segundo mensajero luego de incubar las líneas celulares durante 5, 24, 48 y 72 horas con diferentes concentraciones de PTU (0; 0.1 mM; 0.5 mM; 1 mM y 2 mM). El PTU aumentó los niveles extracelulares del cAMP en todos los tratamientos para ambas líneas. En la línea FRTL-5 hubo un aumento de los niveles extracelulares dependiente de las dosis y del tiempo. Para la línea ARO se observó un pico a las 24 hs en los niveles extracelulares incubados con PTU 1 mM de 36,97 ± 6,37 (fmol/µg de prot) vs Control 16,67 ± 3,92 (fmol/µg de prot). Posteriormente se incubaron e irradiaron ambas líneas celulares con agentes que elevan los niveles intracelulares de AMPc. El efecto radioprotector del PTU fue mimetizado por el cAMP. En la línea ARO la relación Forscolina vs Control fue de 1.7 para 1 y 5 Gy y su adición post irradiación no aumentó la fracción de sobrevida. El dibutiril AMPc no produjo cambios en las fracciones de sobrevida respecto del Control en ambas líneas celulares. Introducción: Numerosos estudios epidemiológicos han demostrado que la exposición a altas dosis de radiación externa incrementa la frecuencia de neoplasias de tiroides, particularmente cuando la misma ocurre en la niñez o en la adolescencia. Los radioprotectores son sustancias que administradas antes de la irradiación, disminuyen el daño ocasionado por la misma. El uso de radioprotectores de la tiroides sería de utilidad para evitar efectos tumorigénicos en la glándula cuando la radiación ionizante en la zona del cuello es la única terapia posible. Objetivos: Estudiar el posible efecto radioprotector de la droga antitiroidea 6 propil-2 tiouracilo (PTU). Se cultivaron células tiroideas normales (línea FRTL-5 de rata) y patológicas (líneas de cáncer humano tiroideo anaplásico ARO). Las mismas fueron irradiadas con una fuente de 60Co (1Gy/min) en dosis variables entre 1 y 8 Gy, en presencia y ausencia de PTU (0.5 y 1 mM respectivamente). A posteriori se evaluó el daño post radiación mediante el ensayo de formación de colonias tomando la fracción de sobrevida (FS) como indicador del efecto. Resultados: la FS aumentó respecto del Control en ambas líneas celulares para todas las dosis utilizadas. La relación PTU vs Control fue de 1.2 y 2.3 (3 Gy) y de 1.3 y 2.7 (5 Gy) para las células FRTL-5 y ARO respectivamente. La incubación con PTU post irradiación no modificó la fracción de sobrevida respecto del control. Dado que se ha demostrado que el aumento de la radioresistencia de los tejidos puede inducirse mediante la estimulación de las vías del AMP cíclico (cAMP), se midieron mediante RIA los niveles del segundo mensajero luego de incubar las líneas celulares durante 5, 24, 48 y 72 horas con diferentes concentraciones de PTU (0; 0.1 mM; 0.5 mM; 1 mM y 2 mM). El PTU aumentó los niveles extracelulares del cAMP en todos los tratamientos para ambas líneas. En la línea FRTL-5 hubo un aumento de los niveles extracelulares dependiente de las dosis y del tiempo. Para la línea ARO se observó un pico a las 24 hs en los niveles extracelulares incubados con PTU 1 mM de 36,97 ± 6,37 (fmol/µg de prot) vs Control 16,67 ± 3,92 (fmol/µg de prot). Posteriormente se incubaron e irradiaron ambas líneas celulares con agentes que elevan los niveles intracelulares de AMPc. El efecto radioprotector del PTU fue mimetizado por el cAMP. En la línea ARO la relación Forscolina vs Control fue de 1.7 para 1 y 5 Gy y su adición post irradiación no aumentó la fracción de sobrevida. El dibutiril AMPc no produjo cambios en las fracciones de sobrevida respecto del Control en ambas líneas celulares.