APLICACIÓN DE LA TÉCNICA DE AUTORRADIOGRAFÍAPARA LA DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE 10B EN UN MODELO EXPERIMENTAL DE MELANOMA

PORTU, A; CARPANO, M; DAGROSA, MA; NIEVAS, S; POZZI, E; THORP, S; CABRINI, R; LIBERMAN, SJ; SAINT MARTIN, G

Buenos Aires

Congreso; XXXVII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Tecnología Nuclear; 2010

CNEA

Introducción: El conocimiento de la localización de 10B en las diferentes estructuras de tejidos biológicos, como tumor y tejido circundante, es esencial al considerar un tratamiento de BNCT. La autorradiografía neutrónica es una de las pocas metodologías que permite estudiar la distribución espacial de elementos emisores en un material que los contenga. Por lo tanto, si se coloca un corte de tejido sobre un detector de trazas nucleares (SSNTD) y se lo irradia con neutrones térmicos, los elementos emitidos en la reacción de captura podrán ser detectados y mapeados. Así, esta técnica resulta apropiada para el estudio de la captación de compuestos borados por las diferentes estructuras histológicas. En nuestro laboratorio, se ha puesto a punto la autorradiografía neutrónica y se ha aplicado para el estudio de diferentes modelos biológicos. En particular, se llevó a cabo el estudio de la microdistribución de 10B en tumores de ratones nude provenientes de un modelo de melanomas cutáneos inyectados con borofenilalanina (BPA). Aún utilizando medios de sostén como OCTTM, la falta de estructura de las zonas necróticas de este tipo de tumores provoca el desgarro de dichas regiones en el proceso de cortado, lo que impide lograr secciones adecuadas para el análisis. Así, resulta necesario abordar otras técnicas, a fin de preservar las áreas necróticas para la cuantificación. Materiales y Métodos: Se investigó la posibilidad de utilizar tejidos que hayan sido incluidos en parafina. Si bien los cortes pueden realizarse con micrótomo convencional deben ser desparafinados antes de colocarlos sobre el SSNTD. Con ese objeto, los cortes se trataron sucesivamente con xilol y alcohol y se flotaron en agua. El proceso de montaje, irradiación y revelado de la muestra continúa de la misma forma que el protocolo descripto en trabajos previos. Resultados y Conclusiones: Las estructuras observadas en las imágenes histológicas pueden reconocerse en sus correspondientes imágenes autorradiográficas. Las zonas de tumor rodeado de piel circundante se observan en la autorradiografía con diferentes tonos de gris, indicando una mayor captación de boro por parte del tumor. En las imágenes histológicas también se observan regiones de necrosis dentro del tumor viable. Estas estructuras se diferencian claramente en la imagen autorradiográfica. Esta metodología resultaría adecuada para visualizar áreas necróticas y analizar diferencias de captación entre éstas y el tejido viable, así como localizar en detalle áreas tumorales y tejido circundante. Deberán estudiarse los factores de corrección a aplicarse para utilizar este tipo de muestras para la cuantificación, ya que durante el proceso de parafinación y desparafinación podría producirse una pérdida de boro.