ESTUDIOS IN VITRO DE LA RESPUESTA CELULAR A LA TERAPIA POR CAPTURA NEUTRÓNICA EN BORO (BNCT) EN CARCINOMA DE TIROIDES.

RODRIGUEZ , C; CARPANO, M; PERONA, M; THORP, S; CUROTTO, P; POZZI, E; CASAL, M; JUVENAL, G; PISAREV, M; DAGROSA, MA

Buenos Aires

Jornada; XXIX Jornadas de Oncologia del Instituto Angel Roffo. Nuevas Tecnologias: mitos y verdades; 2013

Instituto de Oncologia Angel Roffo

Introducción y antecedentes: BNCT se basa en la reacción nuclear que se produce entre el 10B y los neutrones termicos de baja energía. En trabajos anteriores hemos demostrado que tanto el carcinoma indiferenciado como el diferenciado recurrente de tiroides pueden ser tratados eficientemente por esta modalidad radioterapéutica. Más recientemente comenzamos a evaluar los mecanismos biológicos de daño celular que se desencadenan en las células tumorales post irradiación..En este contexto demostramos que el patrón de daño al ADN es diferente para las células irradiadas con gamma que para las células irradiadas con neutrones o con neutrones mas borofenilalanina (10BPA) . En el presente estudio se continuo el análisis de la calidad de daño y de la expresión de los transcriptos de Ku70, Rad51 y Rad54, componentes de la vías de reparación por unión de extremos no homólogos (NHEJ) y por recombinación homóloga (HRR) respectivamente,. . Objetivo: estudiar los mecanismos de daño al ADN y su reparación inducidos por BNCT en células de carcinoma humano de tiroides. Materiales y métodos: células de la línea de carcinoma folicular de tiroides humano (WRO) en fase de crecimiento exponencial fueron distribuidas en los siguientes grupos: 1) BPA (10 µg10B/mL) + neutrones; 2) Neutrones solos; 3) Rayos gamma. Un grupo control para cada tratamiento fue incluído. Las células fueron irradiadas en la facilidad de la columna térmica del reactor RA-3 (flujo = 1.1010 n/cm2 seg) o con una fuente de 60Co. Las irradiaciones se llevaron a cabo durante diferentes lapsos de tiempo a fin de obtener una dosis física total entre 1-5 Gy (±10%). La expresión de los ARNm de Ku70, Rad51 y Rad54 fue analizada mediante transcripción reversa seguida de PCR (RT-PCR) a diferentes tiempos (2, 4, 6, 24 y 48 h) y la cuantificación de la fosforilación de H2Ax por inmunofluorescencia (30 minutos, 1, 2, 4 y 24 horas luego de la irradiación). Resultados: La expresión de Rad51 aumentó a las 2 horas post-irradiación y persistió hasta 6 h solo en el grupo neutrones y neutrones + BPA (p