Modificaciones en la técnica de montaje de cortes histológicos para el análisis de la distribución espacial de boro por autorradiografía.

PORTU, A; CARPANO, M; DAGROSA, MA; POZZI, E; THORP, S; CUROTTO, P; CABRINI, R; SAINT MARTIN, G

Buenos Aires

Congreso; XXXIX Reunion Anual de la Asociacion Argentina de Tecnologia Nuclear; 2012

CNEA

La Terapia por Captura Neutrónica en Boro (BNCT) es una modalidad para el tratamiento del cáncer, basada en la reacción de captura 10B(n,a)7Li. Las partículas emitidas son de alta transferencia lineal de energía y tienen un corto alcance en tejido (~ 10 µm). Por lo tanto, si el boro se acumula selectivamente en las células tumorales, el daño se circunscribirá a las mismas, preservando las células normales. Así, el conocimiento de la localización de 10B en las diferentes estructuras de tejidos biológicos, como tumor y tejido circundante, es esencial al considerar un tratamiento de BNCT (Barth et al., 2005). La autorradiografía neutrónica es una de las pocas metodologías que permite estudiar la distribución espacial de elementos emisores en un material que los contenga. En el marco de BNCT, el primer paso en la realización de una autorradiografía consiste en colocar un corte de tejido por congelación sobre un detector de trazas nucleares (SSNTD) (Wittig et al., 2008). Para este fin, las muestras de tejido son fijadas en N2(líq) en el momento que son resecadas, luego de la infusión del compuesto borado. El arreglo muestra-detector es irradiado con neutrones térmicos y los elementos emitidos en la reacción de captura producen zonas de daño latente en el SSNTD. Atacando químicamente el detector, estas trazas latentes pueden ser amplificadas a nivel de microscopía óptica. De esta forma, puede evaluarse la distribución de 10B en muestras biológicas, por lo que esta técnica resulta apropiada para el estudio de la captación de compuestos borados por las diferentes estructuras histológicas. En nuestro laboratorio, se ha puesto a punto la autorradiografía neutrónica y se ha aplicado para el estudio de diferentes modelos biológicos (Portu et al., 2011a). En particular, se llevó a cabo el estudio de la microdistribución de 10B en tumores de ratones nude provenientes de un modelo de melanomas cutáneos inyectados con borofenilalanina (BPA) (Carpano et al., 2010; Portu et al., 2011b). Aún utilizando medios de sostén para la muestra a cortar, como OCTTM, la falta de estructura de las zonas necróticas de este tipo de tumores provoca el desgarro de dichas regiones en el proceso de cortado, lo que impide lograr secciones adecuadas para el análisis. Así, resulta necesario abordar otras técnicas, a fin de preservar las áreas necróticas para la cuantificación. La preparación de cortes de tejido incluidos en parafina es una técnica ampliamente utilizada en los laboratorios de anatomía patológica. Para lograr estos cortes, las muestras deben ser procesadas previamente. El objetivo de este trabajo es evaluar la factibilidad de utilizar cortes de tejido incluidos en parafina como montaje alternativo, a fin de preservar las estructuras que se dañan en cortes por congelación.