Optimizacion de la terapia por captura neutronica en boro (BNCT) para el tratamiento del cancer de tiroides mediante el uso de inhibidores de histonas deacetilasas (HDACI)

PERONA, M; THORP, S; POZZI, E; CASAL, M; PISAREV , M; JUVENAL, G; DAGROSA, MA

Buenos Aires

Jornada; XXVI Jornadas de Oncologia del Instituto Angel H. Roffo . La investigacion una herramienta parael tratamiento del paciente oncologico; 2010

Instituto de Oncologia Angel H Roffo. Universidad de Buenos Aires

Introducci¨®n: El c¨¢ncer de tiroides es usualmente curable, sin embargo algunos pacientes no responden a ninguna de las terapias actualmente disponibles como cirug¨ªa o tratamiento con radioiodo debido a una pobre captaci¨®n del hal¨®geno. Previamente hemos demostrado que la terapia por captura neutr¨®nica en boro (BNCT) puede ser una alternativa para el tratamiento de este tipo de tumores. BNCT es una modalidad radioterap¨¦utica para el tratamiento del c¨¢ncer basada en la reacci¨®n nuclear 10B (n, ¦Á) 7Li. El ¨¦xito de esta terapia productora de radiaci¨®n de alto LET, depender¨ªa en primera instancia de la habilidad de los compuestos de boro para concentrarse selectivamente en el tumor. Los inhibidores de histonas deacetilasas (HDACI) son compuestos que no s¨®lo poseen actividad antitumoral debido a su comportamiento como inductores de la expresi¨®n de genes, sino tambi¨¦n se ha demostrado que poseen actividad radiosensibilizadora. En este trabajo se evalu¨® in vitro la acci¨®n conjunta de BNCT y el Butirato de sodio (NaB) como radiosensibilizador. Objetivos: Estudiar el uso del inhibidor de histonas deacetilasas NaB como radiosensibilizador para la optimizaci¨®n de BNCT en el tratamiento del c¨¢ncer de tiroides. Materiales y M¨¦todos: c¨¦lulas de la l¨ªnea celular de c¨¢ncer humano tiroideo folicular (WRO) fueron incubadas durante 24, 48 y 72 horas con dosis crecientes de NaB (0,1-1,5 mM) para evaluar el efecto de la droga sobre la proliferaci¨®n celular. Posteriormente, las c¨¦lulas en crecimiento fueron distribuidas en los siguientes grupos: 1) BPA (para- borofenilalanina) (10 ppm 10B) + neutrones; 2) BOPP (2,4-bis (¦Á,¦Â-dihydroxyethyl)-deutero porphyrin IX) (10 ppm 10B) + neutrones; 3) neutrones; 4) gamma. Todos los grupos fueron incubados durante 24 horas con NaB 1mM. Adem¨¢s se realizaron los controles correspondientes para cada tratamiento. La irradiaci¨®n fue realizada con el haz de neutrones del RA3 (CAE) (flujo: 7.5 109n/cm2 seg) y con 60Co (1Gy/min) de manera tal de obtener dosis f¨ªsicas entre 1-5 Gy (¡À10%). La sobrevida celular se evalu¨® a trav¨¦s del ensayo colorim¨¦trico con MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromuro) 4 d¨ªas post irradiaci¨®n. Por otro lado, a las 24 y 48 horas post irradiaci¨®n se eval¨²o morfol¨®gicamente la muerte celular (apoptosis y necrosis celular) por microscop¨ªa de fluorescencia utilizando los colorantes Hoechst 33258,  4,5-diaminofluorescein (DAF) e ioduro de propidio (IP). Resultados: Se observ¨® un efecto inhibidor de la droga sobre el crecimiento celular a todas las dosis usadas a las 48 (p<0,001) y 72 horas (p<0,05). A las 24 h no se observ¨® efecto del NaB sobre el crecimiento por lo que se decidi¨® utilizar ese tiempo. El % de sobrevida celular disminuy¨® en funci¨®n de la dosis en todos los tratamientos. Los factores modificadores de la dosis (FMD) fueron mayores en los grupos BPA y BOPP respecto del grupo neutrones y gamma con valores de 1,2 y 1,3 (3 Gy) y de 1,3 (5 Gy), respectivamente. A las 24 h post irradiaci¨®n se observ¨® que tanto la apoptosis como la necrosis aumentaron en todos los grupos tratados con neutrones respecto de los controles y de gamma. Este aumento fue mayor en los grupos BNCT incubados con NaB para los dos tiempos. Conclusiones: Estos resultados preliminares muestran que el inhibidor de histonas deacetilasas butirato de sodio actuar¨ªa como radiosensibilizador tanto de la radiaci¨®n de bajo LET (gamma) como la de alto LET en las c¨¦lulas de c¨¢ncer de tiroides. El efecto de la droga seria mayor para los grupos tratados por BNCT.