La inhibición del receptor TGFbeta; potencia la radiosensibilidad a la terapia por captura neutrónica en boro (BNCT) in vitro.

ROSSICH L; NIEVAS S; CARPANO M,; PERALTA T; CUROTTO P; POZZI E; THORP S; PERONA M; THOMASZ L; DAGROSA MA

Buenos Aires

Congreso; Jornada de Oncologia del Instituto Angel H Roffo das multidisciplinarias; 2022

Instituto de Oncologia Angel Roffo (UBA)

Introducción: BNCT es una radioterapia no convencional para el tratamiento de los tumores. Esta modalidad tiene dos pasos consecutivos. El primero consiste en la administración al paciente de un compuesto biológico enriquecido con boro-10 (isotopo estable del boro), el cual será incorporado manera selectiva en el tumor. A continuación, se realiza la irradiación del tumor con un haz de neutrones térmicos. En nuestro laboratorio previamente hemos descripto los diferentes mecanismos moleculares inducidos como respuesta al daño doble cadena (DDR) producido por BNCT que conducirán a su muerte o a la tolerancia al tratamiento. Recientemente hemos descrito la inducción por BNCT, de una vía independiente de la DDR regulada por la citoquina TGB beta. La alta concentración de TFG-beta se relaciona con un mal pronóstico, razón por la cual es un blanco terapéutico en la actualidad. El objetivo de este trabajo fue evaluar la activación de la vía TGF beta/Smad, su interacción con la vía clásica de reparación y el posible uso del Ly como radiosensiblizador de BNCT. Materiales y métodos: La línea humana de cáncer de colon (HT29) fueron sembradas en placas de 96 pozos (2000 células/pozo) para estudios de sobrevida celular con MTT y en placas de 60 cm2 para extracción de ARN con Trizol y posterior PCR en tiempo real para estudiar la expresión de la vía TGFbeta/Smad. Además, se realizaron análisis de proliferación celular a través de inmunocitoquimica con el anticuerpo Anti Ki67. Se realizaron 2 tratamientos BNCT (borofenilalanina mas neutrones) y NCT (solo neutrones). Para cada uno de los tratamientos se hicieron 2 grupos (con y sin agregado de LY2109761 (LY), inhibidor de la vía TGFbeta/Smad). El LY se agregó en una concentración de 10 μmol/L durante 2 h. Las placas fueron irradiadas con el haz de neutrones térmicos del reactor nuclear (RA3) (flujo de neutrones=1.1010 n/cm2 seg-1) distintos tiempos para obtener dosis físicas totales de entre 0 a 5 Gy. Luego de la irradiación se cambió el medio y se incubaron durante 2 horas para extraer ARN total, 24 h para inmunocitoquimicas, 5 días para MTT. Resultados: La evaluación de la sobrevida celular a través de la realización de la curva dosis respuesta mostro una disminución de la viabilidad tumoral en función de la dosis física total en Gy para todos los tratamientos. Siendo mayor esta disminución para los grupos incubados con Ly respecto al respectivo grupo sin el agregado del inhibidor. (BNCT, BNCT Ly, NCT, NCT Ly Vs Control, Control Ly (p