Proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK) del tipo p38 y ERK1/2 coparticipan en la alteración secretora biliar inducida por estradiol 17ß-glucurónido (E).

BOAGLIO, ANDREA C; TOLEDO, FLAVIA D.; BAROSSO, ISMAEL R.; ZUCCHETTI, ANDRÉS ERNESTO; SÁNCHEZ POZZI, ENRIQUE J; CROCENZI, FERNANDO A.; ROMA, MARCELO G

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011

SAIC

E induce colestasis vía activación de PKCc y PI3K. Ya que ambas quinasas pueden activar MAPK, indagamos en hígado aislado y perfundido de rata (HAPR) si p38 y Erk1/2 participan en las alteraciones inducidas por E en la función y localización de los transportadores canaliculares responsables de la formación de bilis Mrp2 y Bsep. E (2 µmol/hig) redujo significativamente el flujo biliar (-69±14%, p<0.001). El inhibidor de p38 SB203580 (SB; 250 nM) previno significativamente esta caída (+126±18%; p<0.001), mientras que el inhibidor de ERK1/2 PD98059 (PD; 5µM) aceleró la recuperación del flujo biliar. Inmunomarcación seguida de microscopía confocal reveló que E indujo internalización de Bsep y Mrp2, y que el pretratamiento con SB o PD previno significativamente estas alteraciones. Evaluamos también la aditividad entre PI3K-MAPK, PKCc-MAPK y Erk 1/2-p38 en duplas aisladas de hepatocitos de rata (DAHRs; >200 duplas/grupo, n=3-4). E (200 µM) disminuyó al 36±3% del control (p<0.01) la acumulación canalicular (AC) de CLF, sustrato fluorescente de Bsep. PD (5 mM) y SB (1 µM), junto con el inhibidor de PKCc Gö6976 (Gö, 1µM) o de PI3K wortmanina (WM, 100nM), previnieron parcialmente la disminución de la AC de CLF (E+PD+WM: 63±2%; E+SB+WM: 57±3%; E+PD+Gö6976: 64±0,7%; E+SB+Gö6976: 63±2%; p<0.05); estos valores fueron similares a los de los grupos solo tratados individualmente con cada inhibidor de MAPK (E+PD: 57±2, E+SB :56±1; p<0.05). En cambio, la co-administración de PD y SB resultó en mayor protección (E+PD+SB: 77±2%; p<0.05), sugiriendo efectos complementarios de p38 y Erk1/2. Las variaciones en la AC de GS-MF, sustrato fluorescente de Mrp2, fueron similares a las de CLF. Concluimos que las MAPK p38 y Erk1/2 participan en la colestasis inducida por E como vías independientes y complementarias, lo cual explica sus efectos diferenciales sobre el flujo biliar (inducción de colestasis vs. inhibición de su recuperación). Ambas vías son sin embargo dependientes de PKCc y PI3K.